TÍTULO: SINTESE E ESTUDO ANTIMICROBIANO DE UM DERIVADO TIAZOLIDÍNICO FRENTE A ISOLADOS CLÍNICOS.
AUTORES: PEREIRA; S. L (UFPE) ; SILVA, I. M. (UFPE) ; MAGALHÃES, L. P. M. (UFPE) ; SENA, K. X. F. R. (UFPE) ; ALBUQUERQUE; S. S. M. C. (UFPE) ; SANTOS, M. A. (UFPE) ; ALBUQUERQUE, J. F. C. (UFPE)
RESUMO: O ensino da Química têm despertando o interesse de grande parte dos alunos através da síntese de novos compostos biologicamente ativos. As tiazolidinas apresentarem atividades biológicas comprovadas através de várias publicações. A síntese de um derivado tiazolidínico foi realizada e testada sua atividade microbiológica contra isolados clínicos. O composto foi obtido por condensação da tiazolidina-2,4-diona com 3-metoxibenzaldeído em meio básico. O produto foi cristalizado e determinado a estrutura química. A atividade microbiológica foi verificada pela (CMI) e (CMB). Foram utilizados microrganismos de amostras de sangue de pacientes isoladas e identificadas no Laboratório de Bacteriologia do H. C. da UFPE. Os resultados encontrados apresentaram atividade satisfatória.
PALAVRAS CHAVES: tiazolidinona, 4-tioxo-tiazolidina-2-ona, isolados clínicos.
INTRODUÇÃO: O estudo prático da química vem atraindo vários alunos não só dos cursos de Ciências Exatas como também estudantes de áreas afins. A síntese de novos compostos com atividade farmacológica vem despertando o interesse de vários alunos principalmente dos cursos de Farmácia e de Química. A vinda de alunos ao laboratório deve-se ao fato de novos temas nas aulas práticas ou mesmo de assuntos teóricos de grande interesse para a saúde, referidos em aulas. Esse trabalho foi desenvolvido por alunos de graduação com a intenção de testar sua atividade biológica. Bactérias altamente resistentes a antibióticos conhecidos vem despertando o interesse de estudiosos sobre o assunto com a intenção de descobrirem novos medicamento com eficiência comprovada. Compostos tiazolidínicos sintetizados por nosso grupo têm mostrado eficiência em relação à atividade biológica (ALBUQUERQUE, 1995). Dado ao fato da infecção hospitalar ser responsável pela morte indiscriminada de grande número de pessoas hospitalizadas principalmente nas regiões mais pobres, o estudo de novos medicamentos tem despertado interesse no mundo. Stpyloccocus aureus é um microrganismo temeroso devido principalmente às infecções hospitalares. Ultimamente tem se tornado resistente a vários medicamentos entre estes a oxacilina, com sua sensibilidade reduzida à vancomocina. O meningococo é outro microrganismo que tornou-se resistente à penicilina, e o gonococo resistente às quinolonas. O pneumococo apresenta também resistência à penicilina, com isso tem chamado a atenção de estudiosos (Fernandes 2004). Diante do exposto um grupo de alunos resolveu sintetizar um novo composto e testar sua atividade contra bactérias resistentes. Os testes foram feitos no Depto. de Antibióticos da UFPE. Os resultados foram satisfatórios.
MATERIAL E MÉTODOS: A síntese do composto 5-(3-metoxibenzilideno)-4-tioxo-tiazolidina-2-ona foi desenvolvida através da reação com 4-tioxo-tiazolidina-2-ona e 3-metoxibenzaldeído. A mistura foi aquecida a refluxo em banho de óleo. Após o término da reação o produto foi resfriado, formando um precipitado que foi filtrado, lavado com água destilada e hexano e em seguida submetido à coluna cromatográfica de silica gel. A atividade antimicrobiana preliminar foi verificada pelo método de difusão em disco de papel (BAUER et al., 1966), frente a bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. O teste controle foi realizado com discos embebidos em DMSO. Após o resultado desse experimento foi verificada a CMI e CMB para sete cepas de Isolados clínicos de Staphylococcus aureus provenientes de material isolado de sangue de pacientes infectados do Hospital das Clínicas da UFPE. A CMI foi determinada pelo método de diluição seriada em caldo de Mueller Hinton e foi estabelecida conforme o crescimento visível do microrganismo após um período de incubação de 24 horas a 37ºC. A partir das concentrações onde não houve crescimento visível, foi realizada a CMB. Esta foi feita em placas de Petri contendo o meio agar Mueller Hinton, nas quais foram depositadas 10 µL da solução bacteriana de cada concentração e, em seguida, semeada com alça de Drigalsky para observação do crescimento de colônias. Após incubação por tempo e temperatura adequados, foi feita a leitura e considerada a CMB a partir da concentração onde não houve crescimento de colônias isoladas.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: O composto sintetizado apresentou rendimento 55%, PF: 210º C; Rf: 0,45 (CHCl3/EtOH 9,6: 0,4); Cristalização: Ácido acético. Resultados espectroscópicos de ressonância magnética nuclear protônica (RMN 1H) e infravermelho (IV) e Massas. RMN 1H (DMSO-d6) (ppm): 3,84 (s, 3 H, OCH3); 8,05; 13,70 (s 1H, NH; 7,24 (s 1H, H2) 6,94 e 7,18 (d H4 eH5, J= 8,99Hz. IV (cm –1, KBr 1%): 3165 (NH); 1685 (C=O), 1570 (C=S); 1584 (C=C). A espectroscopia de massas comprovou o M+ (m/e 255). Recentemente, alguns compostos tiazolidínicos foram sintetizados e testados contra microrganismos (BONDE, 2004). Porém trabalhos dessa classe de compostos com isolados clínicos estão sendo realizados pela primeira vez (Tabela 1).
Tabela 1 –Determinação da CMI e CMB do composto sintetizado frente a isolados clínicos de Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus CMI
(Bacteriostática) CMB
(Bactericida) Sítio de infecção Origem
20794 32 64 Sangue Lab.de Microbiologia do H.C.
19924 32 64 Sangue Lab.de Microbiologia do H.C.
20669 16 32 Sangue Lab.de Microbiologia do H.C.
20092 16 16 Sangue Lab.de Microbiologia do H.C.
20449 32 64 Sangue Lab.de Microbiologia do H.C.
20489 16 16 Sangue Lab.de Microbiologia do H.C.
20905 32 32 Sangue Lab.de Microbiologia do H.C.
Os resultados desses testes mostram a possibilidade de outros derivados da tiazolidina também apresentar atividade antimicrobiana. Isso nos mostra perspectivas para continuar sintetizando novos compostos e submetendo a outros testes de atividade biológica. O composto 5-(3-metoxi-benzilideno-4-tioxo-tiazolidina-2-ona apresentou rendimento satisfatório comparados com dados da literatura (ALBUQUERQUE, 1999).
CONCLUSÕES: : O composto apresentou rendimento satisfatório tendo sido comprovada a estrutura química através de métodos físicos convencionais. Quando foi submetido aos testes microbiológicos apresentou atividade contra diversos microrganismos notadamente para germes Gram-positivos. As CMI e CMB foram realizadas para isolados clínicos de sete cepas de Staphylococcus aureus tendo apresentado resultados satisfatórios, que indica a perspectiva de testar com outras cepas mais resistentes. Os experimentos biológicos foram realizados no setor de Microbiologia do Departamento de Antibióticos da UFPE.
AGRADECIMENTOS: À FACEPE pelo suporte financeiro
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: ALBUQUERQUE, J. F. C.; ROCHA FILHO, J. A.; BRANDÃO, S. S. F.; LIMA, M. C. A.; XIMENES, E. A.; GALDINO, S. L.; PITTA, I. R.; CHANTEGREL, J.; PERRISIN, M., LUU-DUC, C. , 1999. Synthesis and antimicrobial activity of substituted imidazolidinediones and thioxoimidazolidinediones Il Farmaco, v. 54, pp. 77-82.
ALBUQUERQUE, J. F.C; ALBUQUERQUE A.;CAZEVEDO, C. C.; THOMASSON, F.; CHANTEGREL, GALDINO, S. L.; CHANTEGREL, J.;CATANHO, M. T. J.; PITTA, I. R., LUU-DUC, C. 1995. Substitued thiazolidinediones and thio-imidazolidinones: synthesis, study and pharmacological activity. Pharmazie, v. 50 n. H, p. 387-389.
BAUER, A. W.; KIRBY, W.M.M.; SHEVIS, J.C.; TURCK, M. 1966. Antibiotic susceptibily
testing by a standardized single disc method. Amer. J. Clin. Pathol., v. 45, p. 493-496.
BONDE, C. G.; GAIKWAD, N. J. 2004. Synthesis and preliminary evaluation of some pyrazine containing thiazolines and thiazolidinones as antimicrobial agentes. Bioorganic & Medicinal Chemistry, 12, 2151-2161.
FERNANDES, A. T. Antibioticoterapia no Pronto Atendimento. http//www.ccih.med.br/antibiot-prontoatend.html. 2004.
