Realizado em Vitória/ES, de 17 a 19 de Setembro de 2014.
ISBN: 978-85-85905-08-8
TÍTULO: Análisis de la actividad antioxidante de acerola (Malpighia emarginata) empleando líquidos iónicos próticos para facilitar la etapa de extracción
AUTORES: Passos, F. (UFBA) ; Yuste, A. (UPV) ; Moraga, G. (UPV) ; Martinez-navarrete, N. (UPV) ; García-martínez, E. (UPV) ; Iglesias, M. (UFBA)
RESUMO: En el presente estudio se analizó la actividad antioxidante de pulpa de acerola
mediante tres métodos de análisis: DPPH, FRAP y ABTS. Para ello se realizaron
extracciones de los compuestos bioactivos de la fruta con metanol puro y con
mezclas de metanol y 10% (p/v) de distintos líquidos iónicos próticos. Los
mayores valores de AAO (actividad antioxidante) se obtuvieron con el método de
ABTS. En general, se comprobó que el empleo de líquidos iónicos próticos (LIP´s)
como agentes separadores mejoró la extracción de fitoquímicos de la acerola,
observándose valores significativamente mayores de actividad antioxidante que en
los extractos metanólicos puros, permitiendo reducir la cantidad de metanol
empleada en la extracción.
PALAVRAS CHAVES: acerola; actividad antioxidante; liquidos iónicos próticos
INTRODUÇÃO: Hay evidencias de que ingesta de alimentos ricos en compuestos naturales
antioxidantes, está asociado con la estabilización de peróxidos y radicales
libres del metabolismo humano y con la reducción de enfermedades crónico-
degenerativas (cáncer, enfermedades cardiovasculares, disfunciones cerebrales,
etc) (Zibadi et al., 2007). Estos efectos se deben a una variedad de compuestos
bioactivos presentes en frutas y vegetales, como vitaminas, fibra, minerales y
compuestos fenólicos (Kim et al., 2007).
En los últimos años, el interés por la acerola ha aumentado en Brasil y en el
mundo debido a su valor nutricional y terapéutico (Morais et al., 2014)). La
acerola (Malpighia emarginata) es un fruto rico en vitaminas (vitamina C,
riboflavina, niacina, tiamina), fibra, sales minerales (hierro, calcio y
fósforo) y fitoquímicos (carotenoides, compuestos fenólicos) (Rufino et al.,
2010). Estos componentes le confieren una elevada capacidad antioxidante. Su
empleo en la industria alimentaria es principalmente para la producción de zumos
y pulpa concentrada (Gonzaga et al., 1996), no presentado hasta el momento
aplicaciones comerciales de alto valor comercial en el área nutracética. Se
conoce su utilidad para gripe, resfriados, enfermedades pulmonares y hepáticas,
y su efecto beneficioso en hepatitis, varicela y poliomelitis (Assis et al.,
2001; Alves et al., 2008).
El objetivo de este trabajo fue evaluar la capacidad antioxidante de pulpa de
acerola empleando 3 ensayos: el método de la reducción del ión férrico ó FRAP,
el método de reducción del radical orgánico DPPH* (2,2-diphenil-1-
picrilhidrazil) y la reducción del radical orgánico ABTS (3-etilbenzotiazoline-
6-sulfonato). Además se probó la eficacia extractora de la adición de distintos
LIP´s a los extractos metanólicos de acerola.
MATERIAL E MÉTODOS: Preparación de la muestra: Se trabajó con pulpa de acerola brasileira congelada.
A la muestra descongelada se le añadió metanol en proporción 1:10 (g
muestra/volumen metanol). Además, al disolvente puro se le adicionó 10% p/v de
distintos LIP´s (2HEAA, 2HEAPR, 2HDEAA, 2HDEAPR, 2HDEASa, 2HDEABe) (Cota et al.,
2007). La mezcla se mantuvo en agitación constante durante 20 minutos, seguido
de centrifugación (8000 rpm, 10 min, 20ºC).
Análisis de la actividad antioxidante: La actividad antioxidante (AAO) de las
muestras se evaluó empleando tres métodos: DPPH, ABTS y FRAP. La absorbancia se
midió en un Espectrofotómetro UV-visible Thermo Electron Corporation, USA. Se
preparó una recta de calibrado, utilizando Trolox (Sigma Aldrich) como patrón.
Los resultados se expresaron como M equivalentes de Trolox (TE)/g muestra
fresca.
-Método DPPH: Se siguió la metodología descrita por Brand-Williams et al.
(1995).
-Método ABTS: El método ABTS consiste en la generación del radical ABTS+*, por
la reacción entre el ABTS y el persulfato de potasio para producir un cromóforo
azul verdoso, cuya absorbancia se lee a 734 nm (Re et al., 1999). En presencia
de antioxidantes se produce una disminución de la absorbancia del radical
ABTS+*.
-Método FRAP: El método FRAP consiste en la formación de un complejo férrico con
el reactivo TPTZ (2,4,6,tripiridi-s-triazina), el cual en presencia de
antioxidantes y pH= 3,6, es reducido al complejo ferroso [Fe(II)-TPTZ], formando
un complejo azul de máxima absorción a 593 nm (Benzie y Strain, 1996).
Análisis estadístico: Para estudiar las diferencias entre muestras, se
realizaron análisis de la varianza (ANOVA) con un nivel de significación del 95%
(p<0,05), empleando el programa Statgraphics Centurion XV.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: En la bibliografía existen muchos disolventes descritos para la extracción de
antioxidantes de alimentos vegetales. Diferentes estudios concluyen que el
metanol es el disolvente orgánico más efectivo para la extracción de compuestos
bioactivos (Oliveira et al., 2009; Sahreen et al., 2010; Razali et al., 2012).
La tabla 1 muestra los valores de actividad antioxidante obtenida para los
distintos extractos metanólicos de acerola con y sin la adición de LIP´s. La
capacidad antioxidante total de una muestra viene determinada por sinergia entre
diferentes compuestos y por el método de acción de cada uno de ellos, por lo que
es aconsejable combinar al menos dos métodos de análisis. En concreto, se
debería combinar el método FRAP, que mide la capacidad de reducción del Fe, con
otros métodos, como el DPPH y ABTS, que determinan la capacidad de captación de
radicales libres de la muestra (Pérez-Jiménez et al., 2008).
La actividad antioxidante de la pulpa de acerola osciló entre 13,8 y 41,8 M
TE/g (Tabla 1), valores similares a los encontrados en bibliografía para esta
fruta (Mezadri et al., 2008). Los valores de actividad antioxidante obtenidos
mediante el método de ABTS fueron significativamente (p < 0,05) mayores. La
adición de LIP´s, a la concentración utilizada, mejoró la extracción de
compuestos bioactivos respecto a los extractos con metanol puro, observándose un
aumento significativo (p < 0,05) en los valores de la actividad antioxidante. El
2HDEAA no mejoró e incluso disminuyó significativamente (p < 0,05) dicho valor.
Para todos los análisis ensayados, 2HDEASa y 2HDEABe mostraron una mayor (p <
0,05) eficacia extractora.
Tabla 1
Actividad antioxidante de acerola analizada mediante
los métodos de DPPH, ABTS y FRAP. expresaron como M
equivalentes de Trolox (TE)/g muestra fresca
CONCLUSÕES: Los resultados obtenidos con las distintas metodologías empleadas para medir AAO
de pulpa de acerola congelada, muestran que esta fruta posee una elevada capacidad
antioxidante. El método ABTS resultó ser el que mayores valores de AAO mostró.
Excepto 2HDEAA, todos los LIP´s empleados mejoraron la extracción de compuestos
bioactivos, lo que se vió reflejado en un aumento significativo de AAO de los
extractos metanólicos, especialmente para 2HDEASa y 2HDEABe. Parece factible el
uso de LIP´s para reducir el uso de reactivos orgánicos tóxicos y dañinos para el
medioambiente y mejorar la etapa de extracción de fitoquimicos.
AGRADECIMENTOS:
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