'ATIVIDADE ANTIMICROBIANA E ENZIMÁTICA DE EXTRATOS DE FOLHAS TERMINALIA CATAPPA LINN (COMBRETACEAE)

ISBN 978-85-85905-25-5

Área

Produtos Naturais

Autores

Araujo, M. (UNILAB) ; Belina, M. (UNILAB) ; Rodrigues, L. (UNILAB) ; Silva, C. (UNILAB) ; Queiroz, B. (UNILAB) ; Nogueira, V. (UNILAB) ; Santos, F. (UFPI) ; Feitosa, C. (UFPI)

Resumo

Terminalia catappa Linn pertencente à família Combretaceae desenvolve-se em regiões tropicais e subtropicais.Objetivou-se realizar testes de inibição da enzima AChE e ensaio antimicrobiano das frações da partição do extrato etanólico das folhas de T.catappa(Linn).As frações hexânica e clorofórmica obtidas da partição do extrato etanólico mostraram leve inibição para Escherichia coli e o extrato etanólico, fração acetato de etila e fração aquosa mostraram leve inibição para Staphylococcus aureus.No teste de inibição da enzima apresentaram-se as seguintes concentrações inibitórias (IC50): extrato etanólico (0,6743), fração hexânica (0,6746), fração clorofórmica (0,7690), fração acetato de etila (0,7621) e fração aquosa (0,6851).Este estudo contribuiu para o conhecimento quimiotaxonômico.

Palavras chaves

Terminalia catappa; Combretaceae; Fitoquímica

Introdução

O Brasil é o país com a maior biodiversidade do mundo com cerca de 8,5 milhões de Km2 e vários biomas (mata Atlântica, Cerrado, Pantanal, Amazônia e Caatinga). Estudos apontam o pais com a flora mais rica e diversificada do mundo com mais de 5600 espécies de plantas que correspondem quase 19% da flora mundial (PIETRO., et al, 2013). Dentre as diversas espécies presentes no Brasil destaca-se no presente trabalho a espécie Terminalia catappa Linn (Combretaceae) sendo conhecida popularmente no Brasil como castanhola, amêndoa da praia, castanheira, chapéu do sol, sete copas, dentre outras denominações (IVANI., et al.,2008). As espécies pertencentes à família Combretaceae apresentam diversas atividades farmacológicas como, por exemplo, antifúngica, antimicrobiana, anti-helmíntica, anticancerígena, anti-inflamatória, antimalárica, antibacteriana, antioxidante dentre outras. Este trabalho terá sua importância na contribuição do ensino, pesquisa e extensão no desenvolvimento científico do país e especialmente do Timor- Leste, com base nos dados obtidos da espécie. Diante do exposto, a proposta deste trabalho é realizar um estudo mais detalhado das folhas de Terminalia catappa L., ampliando informações acerca de suas atividades biológicas contribuído para documentação química e farmacológica da espécie.

Material e métodos

No potencial antimicrobiano utilizou-se a técnica de difusão em discos, de acordo com Bauer et al. Empregou-se as bactérias Escherichia coli e Staphylococcus aureus. As culturas de bactérias obtidas a partir de suspensões em caldo BHI com densidades ajustadas à turvação do tubo com 0,5 da escala de McFarland (108 UFC/mL) foram semeadas na superfície de placas de agar Muller-Hinton. Discos de papel de filtro embebidos com 30 µL de cada amostra (100 µg/mL) foram colocados sobre o meio. Discos de antibióticos comerciais foram usados como controles positivos e clorofórmio como controle negativo. As placas foram incubadas a 37 °C por 24 h. Avaliou-se a formação de halos de inibição ao redor dos discos. Os ensaios foram feitos em duplicata. A atividade inibitória da AChE in vitro baseou-se no método Ellman et al. e Moyo et al. Inicialmente, 100 µL das amostras (concentrações de 0,1, 0,05, 0,025, 0,0125 e 0,00625 mg/mL em solução tampão 50 mM Tris- HCl, pH 8, e 10% de metanol) foram misturados com 100 µL de AChE (0,22 U/mL em 50 mMol/L Tris-HCl, tampão pH 8, 0,1% BSA) e 200 µL de tampão (50 mMol/L Tris-HCl, pH 8, 0,1% BSA). A mistura foi incubada durante 5 min a 30 °C. Após, 500 µL de ácido ditiobisnitrobenzóico (DTNB) (3 mMol/L em Tris-HCl, pH 8, 0,1 mol/L de NaCl, 0,02 mol/L MgCl2) e 100 µL de iodeto de acetiotiocolina (ATCI) (4 mMol/L em água) foram adicionados. Um teste branco foi preparado substituindo a enzima AChE por 100 µL de tampão (50 mMol/L Tris-HCl, pH 8, 0,1% BSA). As amostras foram analisadas em triplicata. Como controle negativo foi utilizado o Tampão (0,1% de metanol em 50 mMol/L Tris- HCl, pH 8, 10%) e o controle positivo rivastigmina. Os valores da concentração efetiva inibitória de 50% (CE50) foram obtidos por intermédio de plotagem Log-Probit.

Resultado e discussão

As folhas secas de Terminalia catappa Linn foram trituradas obtendo-se 353,8 g de material vegetal seco, obtendo-se 4,21 g de extrato hexânico e 38,2 g de extrato etanólico. Uma alíquota do extrato etanólico (20,0 g) foi suspenso em uma solução metanol:água (2:1) e particionado com os solventes hexano, clorofórmio, acetato de etila em ordem crescente de polaridade. As frações hexânica e clorofórmica obtidas da partição do extrato etanólico mostraram leve inibição para Escherichia coli e o extrato etanólico, fração acetato de etila e fração aquosa mostraram leve inibição para Staphylococcus aureus. O teste quantitativo de inibição da enzima AChE apresentaram as seguintes concentrações inibitórias (IC50): extrato etanólico (IC50 = 0,6743), fração hexânica (IC50 = 0,6746), fração clorofórmica (IC50 = 0,7690), fração acetato de etila (IC50 = 0,7621) e fração aquosa (IC50 = 0,6851). O extrato hexânico não apresentou porcentagem alguma de inibição frente a enzima AChE. Utilizou-se como controle positivo a rivastigmina (IC50 = 0,1148).

Conclusões

Os resultados obtidos direcionarão para o fracionamento cromatográfico do extrato etanólico das folhas de Terminalia catappa L. na busca de princípios ativos que corroborem com os resultados já alcançados. Desta forma, destacamos a contribuição deste estudo para o conhecimento quimiotaxonômico do gênero Terminalia e da família Combretaceae.

Agradecimentos

A Universidade da Integração Internacional da Lusofonia Afro- Brasileira (UNILAB) pelo suporte e auxilio financeiro.

Referências

Bauer, A. W.; Kirb, W. M. M.; Sherris, J. C.; Turck, M. Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method. American Journal of Clinical Pathology p. 493 vol. 45. 1966
DIAS, Jhonatta Alexandre Brito. Avaliação das atividades gastroprotetora, anti-inflamatória e antinociceptiva de Spondias tuberosa Arr.Cam.( Anacardiaceae). Campo grande. 2014.
ELLMAN, George L. et al. A new and rapid colorimetric determination of acetylcholinesterase activity. Biochemical Pharmacology, v. 7, n. 2, p.88-95, jul. 1961.
IVANI, Silvia de Azevedo; SILVA, Breno Marques da; OLIVEIRA, Camila de; MORO, Fabíola Vitti. Morfologia de frutos, sementes e plântulas de Castanheira (Terminalia catappa Linn- Combretaceae). Ver. Bras. Frutic., Jaboticabal – SP, v. 30, n. 2, p. 517 – 522, São Paulo, 2008.
MOYO, M.; Ndhlala, A. R.; Finnie, J. F.; Staden. J. V. Phenolic composition, antioxidant and acetylcholinesterase inhibitory activities of Sclerocarya birrea and Harpephyllum caffrum (Anacardiaceae) extracts. Food Chemistry, v. 123, p. 69. 2010
PIETRO, Cocaro et. al : Avaliação fitoquímica pro cromatografia em camada delgada das folhas caídas de Terminalia catappa Linn (Combretaceae). Biociência p. 110 vol.2. UNISANTANA. 2013