Screening fitoquímico de uma espécie de Chamaecrista sp. e avaliação qualitativa da atividade antioxidante via HPTLC

ISBN 978-85-85905-21-7

Área

Produtos Naturais

Autores

Reis, J.D.E. (UEPA) ; Pinheiro, W.B.S. (UFPA) ; Pinheiro Neto, J.R. (UFPA) ; Gomes, P.W.P. (UFPA)

Resumo

Este trabalho objetivou realizar um screening fitoquímico do extrato de uma espécie de Chamaecrista sp., por meio de análise em HPTLC visando à determinação das principais classes de metabólitos secundários existentes, bem como a existência de atividade antioxidante. Os testes revelaram à presença de taninos e flavonoides, este último, possivelmente está correlacionado à ação antioxidante, evidenciado com o método de captura do radical livre DPPH em CCD. Tais resultados podem ser utilizados futuramente para estudos de identificação e isolamento das substâncias que possam ser aplicadas no desenvolvimento de fármacos.

Palavras chaves

Análise fitoquímica; Metabólitos Secundários; Atividade antioxidante

Introdução

O metabolismo pode ser definido como o conjunto de transformações orgânicas que promovem o aproveitamento de nutrientes necessários à continuidade do estado organizado das células. No caso das células vegetais, o metabolismo costuma ser dividido em primário e secundário (MARZZOCO; TORRES, 2007). Os metabólitos primários possuem função estrutural, plástica e de armazenamento de energia, já os metabólitos secundários, produtos secundários ou produtos naturais, aparentemente não possuem relação com crescimento e desenvolvimento da planta (TAIZ; ZEIGER, 2006). No entanto, muitas dessas substâncias destacam-se na área da farmacologia devido a seus efeitos biológicos sobre a saúde da espécie humana (SIMÕES et al., 2007). As principais classes de metabólitos secundários são: flavonóides, alcalóides, cumarinas, agliconas, antraquinonas, triterpenos e/ou esteróides, saponinas, polifenóis e taninos. A planta estudada foi uma espécie de Chamaecrista sp. pertence à família Fabaceae e à subfamília Caesalpinioideae, do mesmo gênero da Chamaecrista nictitans, que segundo Mateos-Martín et al. (2014) encontram-se proantocianidinas, uma classe de polifenóis responsáveis por sua atividade antiviral, mais especificamente, contra o Vírus Herpes Simplex (HSV). A partir destes dados, este trabalho objetivou realizar um screening fitoquímico do extrato de Chamaecrista sp., por meio de análise por HPTLC, visando à determinação das principais classes de metabólitos secundários presentes nesta espécie vegetal, bem como seu potencial antioxidante.

Material e métodos

O material vegetal da Chamaecrista sp. foi coletado na região litorânea do município de Salvaterra-PA e encaminhado ao Laboratório Interdisciplinar de Ciências do Campus XIX (UEPA). Posterirormente, as folhas da espécie pesquisada foram submetidas a secagem em estufa à temperatura de 40ºC (±0,5) por um período de três dias e trituradas em um microprocessador Wallita®. A extração do material triturado foi realizada por maceração em etanol, permanecendo em repouso a temperatura ambiente por 4 dias, após o etanol foi filtrado e evaporado em uma cabine de exaustão. Esse procedimento foi realizado por 4 vezes, até a obtenção do extrato seco para o teste screnning, feito no Laboratório Central de Extração do Instituto de Ciências Exatas e Naturais da Universidade Federal do Pará (CE/ICEN/UFPA). Os testes fitoquímicos qualitativos de terpenos, taninos, flavonóides e alcalóides foram realizados em um sistema robotizado aplicado a Cromatografia Fina de Alta Performance (HPTLC). Utilizou-se como sistema de eluição, Diclorometano/Metanol/Ác. Fómico 1% (90:10), associado a quatro reveladores específicos: VAS, NP/PEG, FeCl3 e Dragendorff. Foram aplicados inóculos com 25, 50 e 75 µg do extrato (5, 10 e 15 µL de 5.000 ppm) para o perfil fitoquímico e o teste antioxidante, realizado avaliando a atividade sequestradora do radical livre DPPH em CCD.

Resultado e discussão

A triagem fitoquímica do extrato etanólico da Chamaecrista sp. evidenciou a presença de grupos metabólicos de interesse farmacológico, sendo classificados em positivo e negativo, de acordo com a presença ou ausência dos mesmos (Figura 1e). O teste com o revelador VAS foi negativo para a detecção de terpenos ou terpenóides (coloração amarelo-marron), mas resultou no aparecimento de bandas na cor roxa (Figura 1a), característica de ácidos graxos (RODRIGUES; SOUZA FILHO; FERREIRA, 2009). A reação para caracterização de flavonóides foi positiva devido a fluorescência de cor amarelo-esverdeada evidenciada, com a utilização do revelador NP/PEG (Figura 1b), visualizado no UV 366nm (VILA, 2006). O teste com a solução de FeCl3, para identificação de taninos, resultou no aparecimento da coloração verde (Figura 1c), indicando a possível presença de taninos condensados (BARBOSA et al., 2004). Não foi confirmada a presença de alcalóides (Figura 1d), visto que não foi observado a formação do precipitado vermelho tijolo, que caracteriza o metabólito secundário frente ao revelador de Dragendorff (BARBOSA et al., 2004). Foi possível observar atividade antioxidante para o extrato da Chamaecrista sp., através da capacidade de sequestro do radical livre DPPH, resultado do aparecimento de bandas (substâncias) que acabaram impedindo a oxidação da sílica (Figura 2c). Segundo Nascimento et al. (2011), este resultado pode esta correlacionado à presença de possíveis flavonóides, observados nas análises do perfil cromatográfico por CCD e espectro de UV 320nm (Figura 2a e 2b). Assim, esse promissor potencial pode ser utilizado para futuros estudos de identificação e isolamento das substâncias responsáveis por esta atividade.

Conclusões

A triagem fitoquímica qualitativa por HPTLC, possibilitou a visualização de bandas características de flavonóides e taninos no extrato etanólico da espécie Chamaecrista sp.. Além disso, foi possível observar atividade antioxidante, que pode estar correlacionada com a presença de flavonóides, classe que foi evidenciada com o revelador NP/PEG e nas análises do perfil cromatográfico por CCD e espectro de UV 320nm. Portanto, a continuidade dos estudos sobre a espécie se faz necessária, a fim de que seja possível a identificação de moléculas bioativas que sejam aplicadas na produção de fármacos.

Agradecimentos

Agradeço ao professor orientador por ter paciência e bom ânimo para ensinar e ajudar, e à UFPA por disponibilizar o Laboratório Central de Extração.

Referências

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