QuEChERS PARA ANÁLISE DE PARATION METÍLICO EM COUVE-MANTEIGA (Brassica oleracea) USANDO HPLC-UV/Vis.

ISBN 978-85-85905-21-7

Área

Química Analítica

Autores

Silva, L. (IFMA) ; Brito, N. (IFMA) ; Santos, P. (IFMA) ; Sousa, E. (IFMA)

Resumo

Um método analítico utilizando QuEChERS associado a HPLC com detecção por UV/Vis foi desenvolvido para análise de um dos pesticidas mais utilizados no cultivo de hortaliças, o paration metílico. O método foi aplicado para análise de amostras de Brassica oleracea que são consumidas na região metropolitana de São Luís e na cidade de Bacabal, no qual as amostras foram preparadas com a aplicação do método de extração QuEChERS e analisadas por HLC-UV/Vis garantindo uma análise rápida, simples e eficiente. A recuperação foi estudada em três níveis de fortificação 0,2, 0,3 a 0,5 mg L-1 obtendo-se recuperação média de 115% e desvio padrão relativo (DPR) de 9,6%. Os limites de detecção e quantificação calculados foram 0,066 e 0,201 mg L-1.

Palavras chaves

Organofosforados; Quechers; HPLC/UV-Vis

Introdução

A extensiva utilização de pesticidas representa grave problema ao meio ambiente e à saúde pública nos países em desenvolvimento, especialmente aqueles com economias baseadas no agronegócio, como no Brasil. Somente nos EUA, segundo a Agência de Proteção Ambiental (EPA), existem mais de 18 mil produtos licenciados para uso, e a cada ano cerca de 1 bilhão de litros de pesticidas são aplicados na produção agrícola, residências, escolas, parques e florestas (COSTA, 20015). A maioria dos casos de intoxicação por pesticidas envolve o uso de agrotóxicos da classe dos organoclorados e dos organofosforados que possuem atividade neurotóxica. O paration é um pesticida OFS geralmente aplicado em plantações de algodão, arroz e árvores frutíferas, é altamente tóxico para os organismos não-alvo (SOUZA, 2016). Com a intenção de agilizar e diminuir a contaminação ambiental, métodos de preparo de amostra rápidos, simples e eficientes estão surgindo para análise multiresidual (BRONDI et al, 2013; LAMBERT, 2012). O método QuEChERS foi criado por Anastassiades e Lehotay (2003) com o objetivo de superar as limitações práticas dos métodos multirresíduo. Com abordagem simples, o método torna-se dinâmico e reprodutível possibilitando bons percentuais de recuperação. Basicamente, é feito em etapas que promovem a extração com solvente orgânico, adição de sal para proporcionar o efeito salting out e o clean up da amostra (OSMAR, D. P. 2009).

Material e métodos

A pesquisa foi realizada no laboratório do Grupo de Estudos Ambientais que possui a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência, equipamento necessário para o trabalho e está localizado no IFMA – Campus São Luís - Monte Castelo. Para o preparo das amostras foram utilizados os métodos QuEChERS, que foi desenvolvido para análise de pesticidas em alimentos e é amplamente utilizado por ser simples e robusto, ainda com a intenção de minimizar uso de solventes e tempo de preparo de amostra. Posteriormente a análise foi feita utilizando a técnica de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. A couve foi coletada, transportada, armazenada em plástico e condicionada em uma temperatura de aproximadamente -5°C. As amostras foram cortadas e maceradas para facilitar o processo de pesagem. Foi pesado 10 gramas da amostra e armazenada em tubo Falcon (50mL), solubilizada com 10 mL de água deionizada e 10 mL de acetonitrila e agitada por 1 minuto, o processo foi realizado em triplicata. Em seguida, foi pesado em triplicata 4g de Sulfato de Magnésio (MgSO4) e 1 g de Cloreto e Sódio (NaCl), solubilizada em cada uma as amostras de couve, e centrifugada por 2 min a 3000 rpm. Foi retirado 2 mL do sobrenadante (três vezes de cada tubo) com uma micropipeta, e adicionada 1 quit QuEChERS, novamente centrifugada por 1 minuto.Logo após, a amostra foi filtrada e armazenada em tubos para análise cromatográfica. Os parâmetros de validação de um método analítico envolvem: Seletividade, Gráfico analítico, Linearidade, Sensibilidade, Exatidão, Precisão, Limite de Detecção (LD), Limite de Quantificação (LQ) e Robustez

Resultado e discussão

CONDIÇÕES CROMATOGRÁFICAS, LINEARIDADE E SENSIBILIDADE DO MÉTODO. Neste método, a faixa de concentração investigada foi de 0,05 a 1 mg L-1 utilizada na construção da curva analítica, pode-se verificar a linearidade do método através do coeficiente de correlação (R) encontrado que foi de 0,9996. O mesmo possui uma correlação fortíssima, demonstrando que o detector obteve uma resposta linear em função do intervalo de concentração estudado, satisfazendo as recomendações da ANVISA (2013) para a validação de métodos analíticos. Bandeira (2014), Vieira (2012) e Velkoska-Markovska (2013), a linearidade, logo, o momento linear obteve um resultado satisfatório, pois resultou em um coeficiente angular (R2) maior que 0,99. o limite de quantificação calculado para o método foi 0,20 mg L-1. De acordo com Brito (2003), o método possui uma excelente seletividade, pois, possui uma alta capacidade de detecção do analito de interesse em função de outros componentes da matriz estudada. A precisão e a exatidão do método foram avaliadas a partir de ensaios de recuperação. Os níveis de fortificação utilizados foram de 0,2; 0,3 e 0,5 mg kg-1. As recuperações encontradas foram de 117%, 116% e 113% para o menor, intermediário e maior nível de fortificação, respectivamente. De acordo com Ribani (2004), Strelau (2013) e Velkoska-Markovka (2013), os intervalos de recuperação são aceitáveis. APLICAÇÃO EM AMOSTRA CAMPO As amostras analisadas foram obtidas de Supermercados localizados em São Luís, das marcas Ilha Nativa e Hort Verde, e de dois Mercados localizados na cidade de Bacabal, sem marca especificada, foram encontradas concentrações que variam de 0,04 e 0,05 mgL-1 em quarto das seis amostras coletadas, mostrando que o paration é amplamente consumido.

Curva de analítica para o composto Paration Metílico com concentração expressa em mg L-1


Cromatograma obtido a partir na injeção de 10 uL do padrão paration metílico

Conclusões

A recuperação foi estudada em três níveis de fortificação 0,2, 0,3 a 0,5 mg L- 1 obtendo-se recuperação média de 115% e desvio padrão relativo (DPR) de 9,6%. Os limites de detecção e quantificação calculados foram 0,066 e 0,201 mg L-1, respectivamente. Os parâmetros sensibilidade, linearidade, e limites de detecção e quantificação, satisfazem às exigências da legislação definida pela ANVISA, e por estudos feitos pelo método já validado. Quanto aos parâmetros relacionados à exatidão e à precisão do método, estes satisfazem as exigências do modelo estatístico aplicado.

Agradecimentos

Agradeço a Deus, que me deu condições para a realização deste trabalho. Agradeço também ao IFMA Campus Monte Castelo pela disponibilazação do laboratório e equipamento

Referências

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