ATIVIDADE FUNGICIDA DO ÓLEO ESSENCIAL DE FOLHAS DE PIPER ARBOREUM

ISBN 978-85-85905-10-1

Área

Produtos Naturais

Autores

Lira, C.S. (UFPE) ; Lima, B.N. (UFPE) ; Procópio, T.F. (UFPE) ; Agra Neto, A.C. (UFPE) ; Thiago, H.N. (UFPE) ; Navarro, D.M.A.F. (UFPE)

Resumo

Piper arboreum, conhecida popularmente como fruto de morcego, pertence à família Piperaceae que compreende mais de mil espécies distribuídas em regiões tropicais e e subtropicais de ambos os hemiférios. Este estudo objetiva investigar a composição química do óleo essencial das follhas da piper arboreum e avaliar a ação do mesmo contra diferentes espécies de fungos. O óleo essencial utilizado, foi obtido através de um processo de hidrodestilação em aparelho de Clevenger modificado e analisado pela técnica de CG- EM, foi possível identificar 53 compostos. O óleo essencial demostrou atividade fungicída contra Candida parapsilosis, Candida tropicalis, Candida albicans e Candida krusei nas concentrações testadas.

Palavras chaves

Piper arboreum; óleo essencial ; atividade fungicída

Introdução

A família Piperaceae é predominantemente tropical e abrange cinco gêneros, Manekia, Peperomia, Piper, Verhuellia e Zippelia. Onde Piper corresponde ao maior gênero da família Piperaceae. O gênero Piper possui várias espécies que se destacam pelo uso na medicina popular, no comércio e na econômia, já que seus óleos essenciais e extratos são muitas vezes utilizados na área farmacéutica e como inseticidas (GUTIERREZ et al., 2013). A Piper arboreum se destaca dentre as espécies de Piper estudadas devido a sua composição rica em monoterpenos, sesquiterpenos e amidas de ação antifungica. As leveduras do gênero Candida constituem um fungo presente na microbiota da pele e mucosa do homem desde o nascimento (SILVA et al., 2002). Do comensalismo (colonização) podem passar a causar infecções superficiais em pessoas saudáveis e, sistêmicas graves. É interessante destacar que cerca de 20 espécies de Candida são reconhecidas como patógenos humanos. As principais espécies de interesse são: C. parapsilosis, C.tropicalis, C. albicans, C. krusei, C. glabrata, C. guilliermondii e C. lusitaniae. (REX et al., 2000). Na literatura já encontra-se estudos que mostram espécie de Candida resistentes a alguns medicamentos antifúngicos sintéticos. Assim, a procura de produtos naturais, tais como óleo essencial e extratos, que mostrem ação antifúngica eficiente é uma alternativa para o controle de Candida (CAVALCANTI et al., 2011).

Material e métodos

As folhas da P. arboreum foram coletadas no Jardim Botânico do Recife garantindo assim a isenção de qualquer tipo de produto químico utilizado como contaminante. O óleo essencial foi extraído através do método de hidrodestilação utilizando um aparelho tipo Clevenger modificado. O processo durou três horas. O óleo obtido foi tratado com sulfato de sódio anidro para retirada da água remanescente. Após o tratamento o mesmo foi analisado pela técnica de CG-EM. Os índice de retenção para cada composto do óleo, foram calculados segundo a equação de Kratz. Para os bioensaios, Cepas padrão das leveduras Candida albicans, C. tropicalis, C. krusei e C. parapsilosis foram obtidas da coleção de culturas da micoteca University Recife Mycologia. As leveduras foram reativadas por incubação em meio Sabouraud-Dextrose a 37ºC por 48 h, sob agitação. Solução estoque do óleo a 1,0 mg/mL foi preparada em etanol 50%. Em placa de microtitulação de 96 poços, foi adicionado previamente 100 µL de meio Sabouraud-Dextrose em cada poço. A amostra de 100 µL foi adicionada ao terceiro poço e submetida a dez diluições sucessivas. Em seguida, foram adicionados 20 μL de levedura, a todos os poços (exceto o primeiro). O 1º poço de cada fileira correspondeu ao controle do meio e o 2º poço correspondeu ao controle 100% de crescimento. Cada ensaio foi realizado em triplicata. Foi feito o controle do meio (1º poço) e o controle de 100% (2º poço). A densidade ótica a 490 nm (DO490) foi determinada em espectrofotômetro para microplacas no tempo 0 e após 24 h de incubação a 37 ºC. A CMI foi determinada como a menor concentração da amostra que promoveu diminuição maior ou igual a 50% em relação à DO490 no poço controle. Havendo inibição do crescimento a concentração mínima fungicida (CMF) foi determinada.

Resultado e discussão

Foram identificados 53 constituintes voláteis, por meio da analise feita no CG- EM do óleo essencial de P. arboreum. Pode-se averiguar que a maior parte dos compostos identificados pertencem a classe dos sesquiterpenos. Os constituintes majoritários do óleo foram: α-Zingiberene (20,86%), ɣ-Muurolene (11,69%), (E)- Nerolidol (7,51%), Bicyclogermacrene (7,33%), (E)-Caryophyllene (7,15%), δ- Cadinene (6,88%), α-Bulnesene (3,04%), 9-epi-(E)-Caryophyllene (2,35%). As concentrações mínima inibitória (CMI) e mínima fungicida (CMF) foram determinadas para o óleo essencial de P. arboreum de acordo com a metodologia descrita anteriormente. Todas as espécies de Candida testadas apresentaram o mesmo valor de CMI (0,25 mg/ml). A CMF foi a mesma (0,5 mg/ml) para as espécies C. tropicalis, C. albicans e C. krusei . Já C. parapsilosis apresentou concentração de 0,25mg/ml.

Conclusões

Nas condições deste estudo, concluiu-se que o óleo essencial das folhas de P. arboreum obtido pelo método de hidrodestilação apresentou 53 compostos, sendo os constituintes químicos majoritários α-Zingiberene, ɣ-Muurolene, (E)-Nerolidol, Bicyclogermacrene, (E)-Caryophyllene, δ-Cadinene, α-Bulnesene e 9-epi-(E)- Caryophyllene. O óleo essencial exerceu atividade antifúngica contra cepas de Candida.

Agradecimentos

Capes, Cnpq e Facep

Referências

GUTIERREZ, R. M. P.; GONZALEZ, A. M. N.; HOYO-VADILLO, C. Alkaloids from piper: a review of its phytochemistry and pharmacology. Mini Rev. Med. Chem.,13, 163-193, 2013.
SILVA, R. V.; NAVICKIENE, H. M. D.; KATO, M. J.; BOLZANI, V. S.; MEDA, C. I.; YOUNG, M. C. M.; Furlan, M. Antifungal amides from piper arboreum and piper tuberculatum. Phytochemistry, 59, 521-527, 2002.
REX, J. H.; WALSH, T. J.; SOBEL, J. D.; FILLER, S. G.; PAPPAS, P. G.; DISMUKES, W. E.; EDWARDS, J. E. Practice Guidelines for the treatment of candidiasis. J Infect Dis.,30, nº 4, 662-678, 2000.
4- CAVALCANTI, Y. W.; ALMEIDA, L. F. D.; PADILHA, W. W. N.; Atividade Antifúngica de Três Óleos Essenciais Sobre Cepas de Candida. Rev. Odontol. Bras. Central, 20, nº 52, 68-73, 2011.