AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIOXIDANTE DO EXTRATO BRUTO E FRAÇÕES DAS FOLHAS DE Syzygium cumini (L.) Skeels.

ISBN 978-85-85905-10-1

Área

Produtos Naturais

Autores

Morais, F.S. (PPGCTRA - ICET/ UFAM) ; Gonçalves, E.S. (ICET/UFAM) ; Acho, L.D.R. (FCF/UFAM) ; Lima, E.S. (FCF/UFAM) ; Guimaraes, A.C. (PPGCTRA - ICET/ UFAM) ; Takeara, R. (PPGCTRA - ICET/ UFAM)

Resumo

Syzygium cumini (L.) Skeels pertence à família Myrtaceae e sub família Myrtoideae. Estudos demonstram as atividades farmacológicas tais como antidiabética e antioxidante. Entre os mais importantes antioxidantes naturais estão os compostos fenólicos (flavonoides e ácidos fenólicos). Dessa forma, torna-se importante determinar a atividade antioxidante do extrato e frações, além de caracterizar as classes de metabólitos secundários dos extratos e frações por cromatografia em camada delgada. Folhas de S. cumini foram coletadas na estrada AM-010, Km 26, sentido Itacoatiara-Manaus, extraídas com etanol 70% e o fracionamento foi realizado pelo processo de partição liquido-liquido utilizando solventes de polaridade crescente. O extrato e todas as frações foram ativas no ensaio de inibição do DPPH.

Palavras chaves

Syzygium cumini; flavonoides; antioxidante

Introdução

Syzygium cumini (L.) Skeels (S. cumini) pertence à família Myrtaceae e sub família Myrtoideae e foi introduzida em muitos países tropicais na África e América Latina. No Brasil é encontrada em diversos Estados das regiões Sudeste, Nordeste e Norte (ROSS, 1999). Vários estudos demonstram as atividades farmacológicas de S. cumini tais como antidiabética (PATEL et al. 2009), anti- inflamatória (KUMAR et al. 2008b) e antioxidante (KANERIA & CHANDA. 2013). Alguns constituintes químicos de S. cumini já foram identificados tais como, antocianina, quercetina, campeferol, ácido elágico, ácido gálico, ácido oleanólico, alcaloides, vitamina C, taninos, eugenol, saponinas, α-pineno, terpineno (AYYANAR & SUBASH-BABU, 2012). Dentre os vários compostos com efeitos benéficos ao organismo, destacam-se os antioxidantes, que são substâncias com funções que permitem ao organismo combater o excesso dos radicais livres, retardando ou prevenindo a oxidação celular (SUHAJ, 2006). Estudos comprovam a relação entre quantidades de radicais livres e o desenvolvimento de doenças como câncer, doenças cardiovasculares e degeneração muscular, pois radicais livres são moléculas altamente reativas que podem interferir em reações normais do organismo causando alterações (BIANCHI & ANTUNES, 1999). Entre os mais importantes antioxidantes naturais estão os compostos fenólicos (flavonoides, ácidos fenólicos e taninos), compostos nitrogenados (alcaloides, aminoácidos, peptídeos e aminas), carotenoides, tocoferóis e ácido ascórbico (AMAROWICZ et al., 2004). Por isso torna-se importante determinar atividade antioxidante (AA) do extrato e frações de S. cumini além de caracterizar as classes de metabólitos secundários dos extratos e frações ativas por cromatografia em camada delgada (CCD).

Material e métodos

Folhas de S. cumini foram coletadas na estrada AM-010, Km 26, sentido Itacoatiara-Manaus, para preparo de extrato bruto. O material seco e moído foi extraído sob refluxo com etanol a 70%, em seguida concentrado até remoção de todo solvente em evaporador rotatório. O fracionamento do extrato bruto foi realizado pelo processo de partição liquido-liquido utilizando solventes de polaridade crescente obtendo as frações (hexano (FHAZ), clorofórmio (FCAZ), acetato de etila (FAAZ), butanol (FBAZ), Hidro alcóolica (FHAAZ) e Precipitado (FPAZ)), em seguida concentrado até remoção de todo o solvente em evaporador rotatório. O perfil químico foi obtido direcionando-se o protocolo para avaliar a presença de terpenos, alcaloides, fenólicos e flavonoides, usando-se para isso reagentes reveladores como: solução de Difenilborato 1% (solução NP), cloreto férrico, vanilina e Dragendorff (GUIMARÃES, 2005). O teor de fenois totais foi determinado pelo método Folin-Ciocalteu (MC DONALD et al. 2001). O método para determinação do teor de flavonoides foi determinado previamente como descrito na literatura (CHANG, et al 2002) com algumas modificações. O ensaio para avaliação da AA foi feito segundo a metodologia de inibição do radical DPPH (2,2-difenil-picril-hidrazil) conforme descrito por MENSOR (2001).

Resultado e discussão

O extrato das folhas de S. cumini apresentou rendimento de 11,61 % (m/m), na partição liquido-liquido do extrato, obteve-se uma massa total de frações de 45,44g, onde os percentuais das frações FHAZ, FCAZ, FAAZ, FBAZ, FHAAZ e FPAZ foram respectivamente, 4,40, 3,65, 68,68, 8,91, 3,48 e 10,87 %. Onde a maior percentagem em massa está na fração FAAZ, que pode caracterizar a presença de classes de metabólitos secundários que apresentam substâncias que possuam média polaridade. A prospecção em CCD indicou a presença de terpenoides, flavonoides e fenólicos. Os resultados do teor de flavonoides e fenóis totais estão apresentados na tabela 1(n = 3). A presença de flavonoides e fenóis totais no extrato bruto e em quase todas as frações. Indica que tais classes de metabolitos têm de agirem como agentes antioxidantes devido ao poder de oxidação dos mesmos (BARREIROS, DAVID & DAVID, 2006). AA e IC50 para o extrato bruto e frações é apresentado na tabela 2 (n=3). Apresentaram AA o extrato e todas suas frações em ordem decrescente FBAZ > FHAAZ > FAAZ > FPAZ > FHAZ > Extrato bruto > FCAZ. AA do padrão de ácido gálico é próximo aos resultados obtidos nas frações polares, assim como os resultados IC50. O valor de IC50 do extrato bruto de S.cumini comparado com resultado encontrado na literatura (MENSOR et al 2001) do extrato padronizado de Ginkgo biloba (IC50 = 40,72 ±0,19 µg/mL), este valor é quatro vezes menor o que indica que é um bom antioxidante. Comparando os resultados da tabela 1 com a tabela 2 pode-se verificar que está AA pode ser devido à presença de fenóis totais e flavonoides, pois estas classes de metabólitos possuem uma grande capacidade de sequestrar os radicais livres pelo poder redutor (SOUSA, et al. 2007).

% de fenóis totais e flavonoides no extrato bruto e frações S.cumini.


Atividade antioxidante do extrato bruto e frações S.cumini

Conclusões

O extrato e frações das folhas de S. cumini apresentaram atividade antioxidante e potencial de inibição relevante. A fração FAAZ foi que apresentou um maior rendimento e o melhor resultado de IC50, o que nos possibilita continuar a pesquisa para que seja possível realizar o isolamento e purificação das substâncias presentes nessa fração. Isto apoiará a identificação das classes de metabolitos secundários que são responsáveis pela inibição do radical DPPH.

Agradecimentos

FAPEAM, CAPES e UFAM pelo apoio financeiro e Bolsa de estudo.

Referências

AMAROWICZ, R., PEGG, R.B. P., RAHIMI-MOGHADDAM, BARL, B., WEIL, J.A. Free-radical scavenging capacity and antioxidant activity of selected plant species from the Canadian prairies. Food Chem. v 84, p. 551–562. 2004.
AYYANAR, M.; SUBASH-BABU, P. Syzygium cumini (L.) Skeels: A review of its phytochemical constituents and traditional uses. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine, p. 240-246, 2012.
BARREIROS, André L. B. S. DAVID, Jorge M. DAVID, Juceni P. Estresse oxidativo: relação entre geração de espécies reativas e defesa do organismo. Química Nova. v. 29, n. 1. 2006.
BIANCHI, M. de L. P. & ANTUNES, L. M. G., Radicais livres e os principais antioxidantes da dieta. Rev. Nutr., May/Aug. v. 12, n.2, p.123-130. 1999. CHANG, C., YANG, M., WEN, H. and CHERN, J. 2002.Estimation of total flavonoid content in Propolis by two complementary colorimetric methods. J. Food Drug Anal. v.10, 178–182.
GUIMARÃES, A.C. Estudo químico e biológico de Cladocolea micrantha (Loranthaceae), uma planta medicinal da região Amazônica. Tese de Doutorado em Ciências. Núcleo de Pesquisa em Produtos Naturais. Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, Brasil, p. 305, 2005.
KANERIA, M; CHANDA,S. Evaluation of antioxidant and antimicrobial capacity of syzygium cumini l. Leaves extracted sequentially in different solvents. Journal of Food Biochemistry, v.37, p. 168–176. 2013. Wiley Periodicals, Inc.
KUMAR, A., ILAVARASAN, R., JAYACHANDRAN, T., DEECARAMAN, M., KUMAR, R.M., ARAVINDAN, P., PADMANABHAN, N. and KRISHAN, M.R.V. Anti-inflammatory activity of Syzygium cumini seed. Afr. J. Biotechnol. v. 7, p. 941–943, 2008b.
MC DONALD, S., PRENZLER, P.D.,ANTOLOVICH, M. and ROBARDS, K. 2001. Phenolic content and antioxidant activity of olive extracts. Food Chem. v. 73, 73–84.
MENSOR, L.L.; MENEZES, F.S.; LEITÃO, G.G.; REIS, A.S.; dos SANTOS, T.C.; COUBE, C.S.; LEITÃO, S.G. Screening of Brazilian plant extracts for antioxidant activity by the use of DPPH free radical method. Phytotherapy research, v.15, p.127-130, 2001.
PATEL, S.S., SHAH, R.S. and GOYAL, R.K. Antihyperglycemic, antihyperlipidemic and antioxidant effects of Dihar, a polyherbal ayurvedic formulation in streptozotocin induced diabetic rats. Indian J. Exp. Biol. v. 47, p. 564–570, 2009.
ROSS, I.A. “Medicinal Plants of the World: Chemical constituents, Traditional and Moderm Uses”, Human Press, Totowa, p. 283-289, 1999.
SOUSA, C. M. M.; SILVA, H. R.; Júnior, G. M. V.; AYRES, M. C. C.; COSTA, C. L. S. C.; ARAÚJO, D. S.; CAVALCANTE, L. C. D.; ARAÚJO, P. B. M.; BRANDÂO M. S. e CHAVES, M. H., Fenóis Totais e Atividade Antioxidante de Cinco Plantas Medicinais. Química Nova. v. 30. 2007.
SUHAJ, M. Spice antioxidants isolation and their antiradical activity: a review. Journal of Food Composition and Analysis, v. 19, p. 531-537, 2006.