ISBN 978-85-85905-10-1
Área
Química Inorgânica
Autores
Terra, W.S. (IFF) ; Cunta de Oliveira, A.C. (IFF) ; Horn Jr, A. (UENF) ; Fernandes, C. (UENF) ; Masahiko Kanashiro, M. (UENF)
Resumo
O crescente aumento do número de casos de câncer em todo o mundo tem preocupado as autoridades internacionais de saúde, visto ser este de difícil tratamento e apresentar significativa representatividade no número de óbitos em todo o mundo. A pesar das diferentes terapias existentes e das crescentes pesquisas nessa área o câncer é responsável hoje por um valor superior a sete milhões de mortes todos os anos em todo o mundo, o que mostra a elevada necessidade de desenvolvimento de novas terapias capazes de controlar os tumores. Neste trabalho foi estudada a ação antitumoral de três compostos de coordenação, assim como de seu ligante em comum frente a linhagem de câncer de pulmão H460. O ensaio com MTT demonstrou que o composto de cobre reduziu significativamente a viabilidade celular.
Palavras chaves
Câncer; H2Salen; Cobre
Introdução
Segunda maior causa de óbitos no país e sétima maior no mundo, com tendência de crescimento nos próximos anos, o câncer é um dos problemas mais complexos que o sistema de saúde brasileiro enfrenta, dada a sua magnitude epidemiológica, social e econômica (INCA, 2013). Hoje em dia a definição de câncer se refere ao termo neoplasia, com foco específico nos tumores malignos, sendo uma doença caracterizada pelo crescimento descontrolado de células transformadas. Os avanços das pesquisas a respeito levaram a três tipos principais de tratamentos antineoplásicos, cirurgia, radioterapia e quimioterapia, sendo esta última a de maior importância, devido às características peculiares da doença. No entanto, quando nos referimos à quimioterapia diversos problemas entram em destaque, como, por exemplo, os baixos índices de cura e quando não existe a possibilidade de cura, a má qualidade de vida advinda do seu uso, pois possui inúmeros efeitos colaterais (ALMEIDA et. al., 2005). Para isso inúmeras pesquisas vêm sendo desenvolvidas com o intuito de desvendar novos compostos que possam apresentar atividade antitumoral elevada, com a menor concentração possível e ainda com maior seletividade às células tumorais. Um destaque vem sendo dado aos compostos de coordenação, primeiro devido às inúmeras atividades biológicas exercidas por íons metálicos e segundo pela alta toxicidade às células tumorais que alguns ligantes puros possuem no organismo (BORGES, 2013). Dessa forma este trabalho visa à síntese, caracterização e estudo da atividade antitumoral in vitro de três complexos com um ligante em comum e centros metálicos distintos frente a linhagem de carcinoma de pulmão.
Material e métodos
O ligante H2Salen foi sintetizado por meio da reação de 1 mL de aldeído salicílico com 0,4 mL de etilenodiamina em 20 mL de metanol. Após seco e caracterizado por técnicas espectroscópicas, realizou-se as reações de complexação pela adição de 1 mmol dos ligantes com 1 mmol dos sais metálicos de cobre, ferro e cobalto em acetonitrla. Os quais tiveram sua composição química determinada pela análise de CHN. A viabilidade celular foi determinada utilizando o metabólico 3-(4,5-dimetiltiazol-2-ila)-2,5-Brometo de Difeniltetrazolium (MTT). O MTT 5,0 mg/mL (20 µL/poço) foi adicionado à cultura de células após 36 horas de tratamento e incubadas por 4 horas a 37 ºC. Após a incubação, foram retirados 150 μL do sobrenadante das culturas de células tumorais e os cristais púrpuras precipitados de MTT foram solubilizados em 100 μL de solução de isopropanol com 0,0014% de HCl fumegante. Após agitação vigorosa as densidades ópticas das amostras foram medida em espectrômetro multicanal com comprimento de onda ajustado para 570 nm.
Resultado e discussão
Nos últimos tempos, o método predominante para verificação de variação na
viabilidade celular é o da utilização do MTT (3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-
difenil brometo tretazólico), devido sua eficiência, fácil manuseio e
significativa precisão. O ensaio consiste na redução do composto chamado MTT
pela enzima succinato desidrogenase, presente na mitocôndria de células em pleno
funcionamento, a um composto de cor roxa característica, chamado formazan. A
mudança de cor permite a quantificação por espectrofotometria, com comprimento
de onda ajustado para a zona do roxo, a 570 nm. Dessa forma, obtém-se resultados
que são proporcionais às células com metabolismo ativo, que são aquelas que
possuem a capacidade de redução do sal tetrazóico (MTT).
Com intuito de se obter uma comparação mais efetiva da atividade dos compostos
foi calculado o IC50 (índice de citotoxicidade 50%) destes, ou seja, foi
calculada a concentração mínima capas de danificar e/ou causar a inviabilidade
celular de 50% das células em análise. O IC50 foi determinado através do
programa Graph Pad Prism versão 4.0, utilizando teste estatístico One-way ANOVA.
Dentre os compostos avaliados somente o [CuSalen] apresentou redução
significativa da viabilidade celular da linhagem H460. apresentando um IC50 de
78,2 μmol/L. Vale ressaltar que o resultado para o complexo foi menor do que
para a cisplatina (105 μmol/L), mostrando assim a importância da avaliação
mecanicista da inviabilidade celular, provocada pela adição deste composto, às
linhagens de H460, um câncer de difícil tratamento e alta resistência.
Efeito citotóxico dos compostos analisados em linhagens de células H460
Conclusões
Com base nos resultados apresentados pode-se concluir que os testes de viabilidade celular com a linhagem de pulmão H460 mostraram atividade inicial expressiva para o complexo [CuSalen](78,2 μmol/L) com atividade maior do que a apresentada pela cisplatina, o que demonstra a proeminência dos compostos N,O-doadores coordenados a metais de transição, principalmente de cobre para produção de novos fármacos com atividade antitumoral.
Agradecimentos
Agradecemos a Universidade Estadual do Norte Fluminense (UENF) e ao Instituto Federal de Educação Tecnológica Fluminense (IFF).
Referências
ALMEIDA, V. L.; LEITAO, A.; REINA, L. C. B.; MONTANARI, C. A. e DONNICI, C. L. Câncer e agentes antineoplásicos ciclo-celular específicos e ciclo-celular não específicos que interagem com o DNA: Uma Introdução. Química Nova, Vol. 28, No. 1, 118-129, 2005.
BORGES, F. V. Tese de doutorado. Centro de Ciências e Tecnologias da Universidade Estadual do Norte Fluminense. “Síntese, Caracterização e Avaliação da Atividade Antineoplásica de Complexos de Cobre e Zinco Frente a Células leucêmicas e melanômicas”. Brasil, Campos dos Goytacazes/RJ, Maio/2013.
INCA - Instituto Nacional do Câncer. Fisiopatologia do câncer, capítulo 2. Disponível em: <http://www1.inca.gov.br/enfermagem/docs/cap2.pdf>, acesso em: 20 de fevereiro de 2014 às 16:18 horas.
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