Realizado no Rio de Janeiro/RJ, de 14 a 18 de Outubro de 2013.
ISBN: 978-85-85905-06-4
ÁREA: Produtos Naturais
TÍTULO: AVALIAÇÃO ANTIFÚNGICA DO ÓLEO ESSENCIAL DE Lippia origanoides Kunth COM OCORRÊNCIA NA FLORESTA NACIONAL DE CARAJÁS FRENTE AO FITOPATÓGENO Fusarium sp.
AUTORES: Ribeiro, A.F. (UFPA) ; Maia, J.G. (UFPA) ; Andrade, E.H.A. (UFPA) ; Rezende, A. (UFPA) ; Ribeiro, F.P. (UFPA) ; Lopes, L. (UFPA) ; Figueiredo, P.L.B. (UFPA)
RESUMO: O presente trabalho visou avaliar a atividade antifúngica dos óleos essenciais
de Lippia origanoides, com ocorrência na Floresta Nacional de Carajás, frente a um fungo
fitopatógeno do gênero Fusarium. Os óleos foram obtidos por hidrodestilação
utilizando sistemas de vidro do tipo Clevenger. A composição química dos óleos
foi elucidada por GC/MS através das comparações dos seus espectros de massa e
índice de retenção com os de substâncias existentes nas bibliotecas do sistema e
com a literatura. Os constituintes voláteis principais identificados foram
carvacrol (22%), 1,8-cineol (18%), γ-terpineno (10%) e E-cariofileno (5%). Os bioensaios foram realizados nas concentrações entre 0,25 a 5 μL/mL. O óleo foi considerado antifúngico com Concentração Inibitória Mínima (CIM) de 0,25 μL.
PALAVRAS CHAVES: Lippia origanoides; Fusarim; Flona de Carajás
INTRODUÇÃO: Os óleos essenciais de algumas espécies de Lippia apresentam excelentes
condições de exploração econômica, com aproveitamento nos mercados de
fragrâncias, farmacêuticos e de defensivos agrícolas (MAIA & ANDRADE, 2009).
Além de se destacar pela grande diversidade botânica e ampla distribuição, o
gênero Lippia tem recebido importante atenção por apresentar espécies que podem
ser utilizadas para os mais diversos fins. Dentre estes, um grande número de
espécies se destaca por apresentar propriedades medicinais comprovadas. Por
exemplo, Lippia alba possui efeitos contra a malária (GASQUET et al., 1993),
efeito antiviral (ABAD et al., 1995), atividade citostática (SLOWING BARILLAS,
1992; KLUEGER et al. 1997), assim como ação sedativa, diurética, anti-
reumática, antiinflamatória e outras (MORTON 1981; COSTA, 1998;
VALE et al., 1999; PASCUAL et al., 2001) e defensivos agrícolas (STASHENKO,
JARAMILLO & MARTÍNEZ, 2003).
Apesar das espécies de Lippia apresentarem diversos usos, muitas ainda não foram
estudadas e de acordo com as pesquisas, são matérias primas promissoras para o
isolamento de novas substâncias químicas com diferentes atividades
farmacológicas (ABAD et al., 1995; PASCUAL et al., 2001; STASHENKO, JARAMILLO & MARTÍNEZ, 2003).
A maioria do gênero Fusarium produz micotoxinas a exemplo das fumonisinas,
deoxinivalenol e zearalenona, que são substâncias tóxicas que mais causam danos
neurológicos e mais frequentemente estão associadas a doenças em animais e
humanos. Assim, considerando contaminações fúngicas, especialmete por fusarium,
aliado ao considerável crescimento em pesquisas de controle de doenças fúngicas
nos últimos anos (Diniz et al., 2008) estudou-se de forma preliminar a ação
antifúngica do óleo de L. origanoides em Fusarium sp.
MATERIAL E MÉTODOS: O material botânico foi coletado na FLONA de Carajás (autorização ICMBio 24852-
1). Exsicatas foram depositadas Herbário do Museu Goeldi, em Belém, para
identificação da espécie. As folhas (20 g) foram submetidas à hidrodestilação no Laboratório de Produtos Naturais-UFPA. Foram utilizados sistemas de vidro
do tipo Clevenger modificado, acoplado a sistema de refrigeração com temperatura da água de condensação a 15º C. Os óleos essenciais obtidos foram centrifugados, secos com sulfato de sódio anidro, armazenados em ampola de vidro âmbar na ausência de oxigênio e conservados em ambiente refrigerado entre 5 a 10 ºC.
O rendimento em óleo foi realizado através da relação do volume do óleo obtido
com a massa do material utilizado na destilação, considerando-se esta base livre de umidade.
A composição química dos óleos essenciais foi determinada por técnica CG/EM,
usando-se um equipamento Thermo, modelo Focus DSQII, com coluna capilar de
sílica DB-5ms (30mx0,25 mm; 0,25 μm de espessura de filme) nas condições
operacionais adequadas.
Os componentes químicos foram identificados através das comparações dos seus
espectros de massas (EM) e índice de retenção (IR) com os de substâncias padrão
existentes nas bibliotecas do sistema e com dados da literatura (NIST, 2005;
Adams, 2007). Os IR foram obtidos utilizando uma curva de calibração de uma
série homóloga de n-alcanos injetados nas mesmas condições cromatográficas das
amostras de óleos.
Os bioensaios com fungos foram realizados no Laboratório de Biologia da UFPA,
Campus de Marabá. Os tratamentos com os óleos essenciais foram nas concentrações
de 0,25; 0,5; 0,75; 1; 2,5 e 5 μL/mL, além do grupo controle. A cada dois dias
foram feitas as medições ortogonais do diâmetro da colônia do fungo durante 10
dias (240 hs).
RESULTADOS E DISCUSSÃO: A espécie coletada foi identificada como Lippia origanoides Kunt. A Fig 1 é o
cromatograma da mistura dos óleos essenciais obtidos das folhas de L.
origanoides coletada na FLONA de Carajás. Os constituintes principais das
amostras das folhas foram carvacrol (22,6%), 1,8-cineol (18,8%), γ-terpineno (10,4%), E-cariofileno (5,9%)
e p-cimeno (5,3%). Os constituintes químicos estão listados na Tab 1.
Espécimes de L. origanoides coletadas na Serra de Carajás e em outros locais da
Amazônia, apresentaram, de um modo geral, pricipalmente timol, 1,8 cineol e
carvacrol, além de E-nerolidol, α-pineno, p-cimeno, éter metílico do timol e
(E)-cariofileno em menores quantidades e dependendo da parte da planta estudada,
época e local de coleta. Outro espécime coletado em Carolina (MA) apresentou
1,8-cineol (56%) como majoritário (Maia et al 2003).
O óleo de L. origanoides frente ao fungo Fusarium sp apresentou boa atividade fúngica. A Fig 2 ilustra a formação dos halos deA atividade fungicida d inibição em placa de
frente aos fungos no final do experimento. É perceptível a maior inibição com
concentração em 5μL/mL, onde o fungo apresentou crescimento mínimo.
O desenvolvimento dos fungos foi avaliado por um período de 10 dias (240 horas).
As medidas estão listadas na Tab 2. Apesar de ser um estudo preliminar, o
presente trabalho mostrou que o crescimento do fungo Fusarium sp foi bastante
inibido quando utilizou-se concentração de 5,0 μL do óleo essencial, pois o
crescimento foi mínimo ao longo do período estudado. A CIM foi determinada na
concentração de 0,25 μL. Óleos essenciais de plantas apresentam atividade
antimicrobiana contra um grande número de bactérias, incluindo espécies
resistentes a antibióticos e antifúngicos (DINIZ 2008).
Figuras 01 e 02
Fig. 01: Cromatograma do óleo essencial;
Fig. 02: Placas com funngos em meio de cultura +
óleo em diferentes concentrações.
Tabelas 01 e 02
Tab.1: Constituintes voláteis de Lippia origanoides.
Tab.2: Crescimento do fungo ao longo do período.
CONCLUSÕES: A espécie coletada na Floresta Nacional de Carajás foi identificada como Lippia origanoides Kunt que é reconhecida do ponto de vista taxonômico.
Os principais componentes químicos identificados em diferentes partes de L. origanoides foram carvacrol, 1,8-cineol, γ-terpineno, E-cariofileno e p-cimeno.
O óleo das folhas de Lippia origanoides apresentou significativa atividade fungicida contra o fungo fitopatógeno do gênero Fusarium.
A CIM (Concentração Inibitória Mínima) foi 0,25 μL/mL.
AGRADECIMENTOS: ICMBio, pela autorização de coleta.
Companhia VALE, pelo apoio.
Laboratório de Fitopatologia (UFRPE), por ceder os fungos.
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