ÁREA: Iniciação Científica

TÍTULO: IDENTIFICAÇÃO DE COMPOSTOS ELETROFISIOLOGICAMENTE ATIVOS NA MISTURA FEROMONAL DE MACHOS DE Anastrepha fraterculus (DIPTERA: TEPHRITIDAE)

AUTORES: Costa de Aquino, N. (UFAL) ; Lima Ferreira, L. (UFAL) ; de Farias Tavares, R. (UFAL) ; Milet Pinheiro, P. (UFPE) ; Maria do Amaral Navarro, D. (UFPE) ; Vanicková, L. (UFAL) ; de Lima Mendonça, A. (UFAL) ; Rufino do Nascimento, R. (UFAL)

RESUMO: Este estudo objetivou avaliar a resposta eletrofisiológica das antenas de fêmeas virgens de Anastrepha fraterculus aos compostos voláteis liberados por machos co-específicos pelo emprego da técnica de Cromatografia Gasosa acoplada à Eletroantenografia (CG-EAG). Os resultados demonstraram que seis compostos eliciam resposta eletrofisiológica em fêmeas virgens e através da técnica de Cromatografia Gasosa bidimensional acoplada à Espectrometria de Massas (CGxCG- TOF-MS), estes compostos foram identificados como sendo: α-pineno, limoneno, (Z)-3-nonen-1-ol, (E,Z)-3,6-nonadien-1-ol, (E,E)-α-farneseno e epianastrefina. Ensaios comportamentais deverão ser conduzidos para verificar as repostas comportamentais que as soluções dos compostos individuais e as misturas destes eliciam em fêmeas

PALAVRAS CHAVES: [i]A. fraterculus[i]; eletroantenografia; identificação química

INTRODUÇÃO: As moscas-das-frutas estão entre as pragas de maior restrição quarentenária no comércio internacional, podendo causar grande impacto econômico por embargos fitossanitários (CLARKE et al., 2005). Dentre as espécies de mosca das frutas de importância econômica encontra-se a Anastrepha fraterculus. A literatura relata que os machos de A. fraterculus, produzem e liberam feromônio sexual para atrair as fêmeas objetivando o acasalamento (LIMA et al., 1996). Os constituintes químicos da mistura feromonal liberada por machos de uma população de A. fraterculus proveniente da região Sul do Brasil já foram reportados na literatura (LIMA et al., 2001), entretanto, a atividade biológica dos componentes da mistura feromonal ainda é desconhecido. Pelo exposto, o presente estudo objetivou avaliar a resposta eletrofisiológica das antenas de fêmeas virgens de A. fraterculus aos compostos voláteis liberados por machos co-específicos pelo emprego da técnica de Cromatografia Gasosa acoplada à Eletroantenografia (CG-EAG) e identificá-los através da técnica de Cromatografia bidimensional acoplada à Espectrometria de Massas (CG x CG-TOF-MS).

MATERIAL E MÉTODOS: Os machos e fêmeas de A. fraterculus empregados neste estudo foram provenientes de uma população já estabelecida no laboratório de Ecologia Química da UFAL. Ao atingirem a maturação sexual, os machos foram submetidos à técnica de aeração, utilizando Tenax® como adsorvente, por um período de 24 horas, para extração dos compostos voláteis liberados por eles. Findo este tempo, os compostos foram dissolvidos com hexano (3 mL) e submetidos a análises por Cromatografia Gasosa acoplada ao Detector Eletroantenográfico (CG-EAD) e Cromatografia Gasosa bidimensional acoplada à Espectrometria de Massas (CG x CG- TOF-MS). A identificação dos compostos que eliciaram atividade eletrofisiológica em fêmeas foi efetuada por interpretação dos seus respectivos espectros de massas, por comparação destes com as bases de dados disponíveis (MCLAFFERTY & STAUFFER, 1989) e por comparação de seus índices de retenção com os que estão reportados na literatura (www.pherobase.com). A técnica de CG-EAD utilizou a antena de fêmeas de A.fraterculus, com 10-20 dias. Para tanto, a extremidade apical da antena foi conectada ao eletrodo de trabalho e a outra extremidade ao eletrodo de referência com utilização de uma solução de Ringer para permitir a passagem da corrente elétrica. Um fluxo de ar umidificado foi mantido sobre a antena para evitar a desidratação. O eletrodo de trabalho foi ligado a um pré-amplificador e a antena foi colocada na saída do fluxo de ar que continha o extrato dos machos, gerando uma despolarização quando o composto apresentava atividade biologica. O acoplamento do sistema EAD com o CG permitiu a identificação dos compostos bioativos na antena através do registro simultâneo das repostas da antena de fêmeas (EAD) e do detector do CG (FID).

RESULTADOS E DISCUSSÃO: As análises por CG-EAD revelaram que as antenas de fêmeas de A. fraterculus respondem a seis compostos presentes nos extratos obtidos por aeração de machos (Figura 1). Estes compostos foram identificados como:α-pineno, limoneno, (Z)-3-nonen-1-ol, (E,Z)-3,6-nonadien-1-ol, (E,E)-α-farneseno e epianastrefina (trans-hexaidro-cis-4,7α-dimetil-4-vinil-2-(3H)-benzofuranona) (Figura 2). Este estudo constitui o primeiro relato da atividade eletrofisiológica em espécies do gênero Anastrepha, visto que, um estudo anterior, conduzido com uma população brasileira de A. fraterculus, não atribuiu nenhuma atividade biológica, comportamental ou eletrofisiológica, aos compostos identificados (LIMA et al., 2001). Ensaios comportamentais deverão ser conduzidos para verificar as repostas comportamentais que as soluções dos compostos individuais e as misturas destes eliciam em fêmeas desta espécie.

Figura 1

Resposta de antenas de fêmeas virgens de A. fraterculus aos componentes da mistura feromonal de machos co-específicos.

Figura 2

Compostos com atividade antenal identificados por CGxCG/TOF-MS. TR-tempo de retenção em 1ª e 2ª dimensão. KI-Indexo de retenção para coluna ZB-5MS.

CONCLUSÕES: Seis componentes da mistura feromonal liberada por machos de A. fraterculus eliciam resposta eletrofisiológica em fêmeas virgens desta espécie.

AGRADECIMENTOS: CAPES, CNPq, IQB-UFAL, RENORBIO

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: CLARKE, A. R.; ARMSTRONG, K. F.; CARMICHAEL, A. E.; MILNE, J. R.; RAGHU,
S.; RODERICK, G. K.; YEATS, D. K. 2005. Invasive phytophagous pests arising through a recent tropical evolutionary radiation: The Bactrocera dorsalis complex of fruit flies.Annual Review of Entomology, v. 50, p. 293-319.

LIMA, I. S., HOWSE, P. E., and STEVENS, D. R. 1996. Volatile components from the salivary glands of calling males of the South merican fruit fly, Anastrepha fraterculus: Partial identification and behavioural activity, pp. 107-113, in B. A. McPheron And G. J. Steck (eds.). Fruit Fly Pests: A World Assessment of their Biology and Management. St. Lucie Press, Boca Raton, USA.

LIMA, I. S., HOWSE, P. E., and DO NASCIMENTO, R. R. 2001. Volatile substances from male[i] Anastrepha fraterculus[/i] (Diptera: Tephritidae): Identification and behavioural activity. J. Braz. Chem. Soc. 12:196-201.

McLAFFERTY, F. W. and STAUFFER, D. B. 1989. The Wiley/NBS Registry of Mass Spectral Data, Vol. 1. Wiley Interscience, New York, USA