Realizado no Rio de Janeiro/RJ, de 14 a 18 de Outubro de 2013.
ISBN: 978-85-85905-06-4
ÁREA: Química Orgânica
TÍTULO: Estudos fitoquímico e atividade anti-hemorrágica de Bredemeyera floribunda Will.
AUTORES: Oliveira, A. (UFRN) ; Araujo, R. (UFRN) ; Ximenes, R. (UFC)
RESUMO: Certas espécies de plantas são utilizadas na tradição popular para
tratar
acidentes com animais peçonhentos e seus estudos químicos se
mostram
interessantes para isolamento e identificação de compostos
biologicamente
ativos. A espécie Bredemeyera floribunda, objeto de estudo deste
trabalho, é uma
destas. O estudo cromatográfico preliminar desta planta indicou a
presença de
açúcares, saponinas e rutina, no extrato etanólico. O estudo
antihemorrágico
mostrou atividade para o extrato da planta, mas não para o
constituinte
majoritário, o flavonóide rutina. A próxima etapa será realizar o
fracionamento
cromatográfico do extrato etanólico da raiz de B. floribunda e a
identificação
de substâncias através das propriedades físicas e técnicas
analíticas como
ressonância magnética nuclear (RMN 1H e
PALAVRAS CHAVES: raiz-de-cobra; Bredemeyera floribunda; rutina
INTRODUÇÃO: A utilização de plantas no tratamento de acidentes peçonhentos é
uma prática
comum em vários povos do mundo, principalmente em regiões de
difícil acesso ao
soro anti-ofídico. “Específico Pessoa” é um fitoterápico antiofídico
amplamente
utilizado pela população do Norte e Nordeste do Brasil desde o início
do século
XX (SILVA, 1995). O estudo químico deste fitoterápico por
Nakagawa e
colaboradores (1987) levou ao isolamento dos pterocarpanos e
cabenegrinas, que
tiveram posteriormente a comprovação de sua atividade antiofídica
contra veneno
de Bothrops atrox.
A partir deste estudo, a investigação fitoquímica de plantas do
Nordeste
utilizadas como antiofídicas foi estimulada e alguns extratos de
plantas tiveram
sua atividade antiofídica relatada. Este relato associado ao uso
etnofarmacológico de B. Floribunda motivou, a investigação
fitoquímica desta
espécie, popularmente conhecida como “raiz de cobra” e usada na
medicina popular
no tratamento de acidentes ofídicos. (MARONI, 2006). Este estudo é
bioguiado
com resultados de atividade anti-hemorrágica, induzida pelo veneno
de Bothrops
Jararacussu. O envenenamento causado por peçonhas deste gênero
pode levar a
hemorragia local, edema, necrose tecidual e/ou muscular, choque,
dentre outros,
podendo assim levar à perda permanente de tecido ou amputação
de membros
afetados (HAGE-MELIM, 2009 ).
A família Polygalaceae engloba alguns gêneros, dentre eles o
Bredemeyera, com
espécies encontradas nas Américas Central e do Sul e nas Índias
Ocidentais. No
Brasil, este gênero é representado por 14 espécies que estão
dispostas desde o
nordeste até o estado do Paraná, na região sul do país, com a
maioria ocorrendo
entre os estados do Amazonas e Minas Gerais.
MATERIAL E MÉTODOS: O material vegetal foi coletado no horto de plantas medicinais da
UFC e
identificado pelo prof. Francisco José de Abreu Matos. O material foi
submetido
a processos de secagem, moagem e extração com solventes
(hexano e etanol),
utilizando métodos a frio (maceração) ou a quente (soxhlet ). Foi
realizado um
fracionamento inicial, no qual 14,0 g de extrato etanólico da raiz de
B.
floribunda (BFRE) foi cromatografado em sephadex LH-20, rendendo
5 frações, A
(6,1 g), B (0,5 g), C (0,9 g), D (2,6 g) e (3,2 g), que foram analisadas
por RMN
1H, para caracterização química inicial do extrato.
Atividade anti-hemorrágica
Para avaliação do perfil anti hemorrágico foram utilizados
Camundongos machos
Swiss, (18-22 g, n = 6), que foram anestesiados com pentobarbital
sódico
(50mg/kg i.p.) para posteriormente ter o dorso tricotomizado onde
foi injetado
por via intradérmica 30 µL de uma solução contendo 50 µg de vBju.
Os animais
foram divididos em seis grupos. Após 2 h para cada grupo, os
animais foram
sacrificados e a pele do dorso foi removida. A superfície interna da
pele foi
examinada e fotografada. O tamanho da área hemorrágica foi
medido com o Image J.
Este método será utilizado nos testes posteriores com frações e
substâncias
puras obtidas.
BFRE e frações deste foram avaliadas em testes de atividade anti-
hemorrágica,
utilizando ratos (n = 6, 25 - 30 g), macho anestesiados (Hypnol ®, 60
mg / kg,
ip) e injetados com 50μg de veneno de B. jararacussu (0,05 mL de
PBS estéril,
pH 7,4) por via intradérmica na pele dorsol.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: O estudo fitoquímico preliminar possibilitou identificar as classes de compostos
presentes em BFRE, que foi dividido em 5 frações A-E. A fração A revelou sinais
característicos da presença de saponinas e açúcares, a fração B apresentou
sinais quase exclusivamente do açucar sacarose, na fração C ainda apresentou a
sacarose e grande quantidade do flavonóide rutina (Figura 1), este presente puro
em toda a fração D e a fração E demonstrou sinais característicos da mistura de
compostos flanonoídicos e xantônicos.
Os animais tratados com BFRE tiveram diminuição da área hemorrágica em relação
ao controle e aos animais tratados com soro antibotrópico, mas o tratamento com
rutina não apresentou efeito.
Figura 1. Estrutura química do flavonóide rutina
As perspectivas atuais são de isolar, identificar e caracterizar um número maior
de componentes da planta responsáveis pela atividade antiofídica, provavelmente
pertencentes à classe das saponinas. Estudar e caracterizar todos os componentes
de interesse isolados, assim como verificar possibilidades de melhorias nas
funções biológicas, através de procedimentos de síntese orgânica, partindo dos
metabólitos secundários naturais.
Figura 1.
Estrutura química do flavonóide rutina
CONCLUSÕES: O estudo fitoquímico bioguiado do extrato etanólico da raiz de B. floribunda
permitiu o isolamento de grande quantidade do flavonóide rutina, no entanto esta
substância não é responsável pela ação anti-hemorrágica deste extrato. Vale
considerar que a soroterapia tradicional tem eficácia limitada contra os efeitos
locais dos acidentes peçonhentos e compostos isolados de plantas mostram-se uma
boa alternativa para complementar este tratamento, o que torna a continuidade
deste estudo bastante promissor, a fim de identificar o princípio ativo desta
planta.
AGRADECIMENTOS: Os autores agradecem a CNPq, FAPERN e CAPES pela bolsa e apoio financeiro.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: BEVEVINO L. H., SANIOTO S. M. L., Effect of crude extract of roots of Bredemeyera-floribunda willd .3. effect on hormone-stimulated water transport in isolated frog-skin , Journal of Ethnopharmacology,43, 3, 1994.
COSTA, R. R. Paulo, Produtos naturais como ponto de partida para a descoberta de novas substâncias bioativas: candidatos a fármacos com ação antiofídica, anticâncer e antiparasitária, Rev. Virtual Quím., 1, 1, 58-66, 2009.
DAROS do M. R., MATOS F J, PARENTE J P, A new triterpenoid saponin, bredemeyeroside B. from the roots of Bredemeyera floribunda, Planta Medica, V 62, 6, 1996.
SILVA, G. L.; ABREU MATOS, F. J.; SILVEIRA, E. R. 4'-Dehydroxycabenegrin A-I from roots of Harpalyce brasiliana. Phytochemistry, 46, 1059-1062, 1997.
MARONI B. C., STASI L. C. DI, MACHADO, S. R. , Plantas Medicinais do Cerrado de Botucatu: Um Guia Ilustrado, Ed. UNESP, 2006.