ÁREA: Produtos Naturais
TÍTULO: ANÁLISE FITOQUÍMICA E AVALIAÇÃO DAS ATIVIDADES ANTIACETILCOLINESTERASE, ANTIOXIDANTE E TOXICIDADE FRENTE ARTEMIA SALINA DO EXTRATO ETANÓLICO DA CASCA DO CAULE DE MANILKARA ZAPOTA (SAPOTI).
AUTORES: de Carvalho Filho, M.A.F. (UECE) ; Cavalcanti, E.S.B. (UECE) ; de Souza Filho, A.C.F. (UECE) ; Menezes, J.E.S.A. (UECE) ; Sousa, A.F. (UECE) ; Costa, S.M.O. ()
RESUMO: O presente trabalho objetivou avaliar o extrato etanólico, da casca do caule do sapoti, frente atividades biológicas tais como: antiacetilcolinesterase, antioxidante e toxicidade frente Artemia salina, bem como identificar a classe dos constituintes químicos, deste extrato, através de análise fitoquímica.
PALAVRAS CHAVES: mal de Alzheimer; antioxidante; sapoti
INTRODUÇÃO: Nas ultimas décadas os produtos naturais veem se tornando foco de estudos de vários pesquisadores nas mais diversas instituições, retomando, assim, sua importância e contexto histórico. Os chamados metabólitos secundários (produtos naturais) são compostos químicos de estrutura razoavelmente complexa encontrados nas plantas, sendo, responsáveis, por exemplo, por mecanismos de proteção contra os ataques de pragas. O estudo da atividade antiacetilcolinesterásica é de grande importância, principalmente, na prevenção do mal de Alzheimer, que é uma patologia neurodegenerativa caracterizada pela perda das capacidades cognitivas superiores, ocasionando em perda de memória. Uma das alternativas para tratar esta doença é aumentar o nível do neurotransmissor acetilcolina (ACh) no cérebro, usando inibidores da enzima acetilcolinesterase (AchE) ( FILHO et al., 2006). Neste contexto, os antioxidantes de origem natural merecem atenção especial, pois as plantas sintetizam um grande numero de metabólitos capazes de captar os radicais livres (POTTERAT, 1997), que são os causadores do envelhecimento de nosso tecido epitelial. Inúmeros estudos apresentaram evidências de que o estresse oxidativo, através da formação de radicais livres de oxigênio, pode contribuir para a patogenia da Doença de Alzheimer, o que justificaria o estudo de substâncias antioxidantes (LARSON, 1995). O sapotizeiro (Manilkara zapota ) é nativo do Sul do México e da América Central. O extrato etanólico da casca do caule do sapotizeiro apresentou resultados satisfatórios frente aos estudos de avaliação de inibição da enzima acetilcolinesterase, bem como nas atividades antioxidantes e toxicidade frente Artemia salina.
MATERIAL E MÉTODOS: A casca do caule da planta, foi cortada em pedaços pequenos e colocada em um recipiente de vidro com álcool etílico durante um período de uma semana para a obtenção do extrato etanólico da Manilkara zapota onde esse extrato foi rota-evaporado, sob pressão reduzida, e o extrato obtido foi submetido ao teste fitoquímico e ensaios biológicos. O estudo da atividade antiacetilcolinesterase consiste em um ensaio baseado no método colorimétrico de ELLMANN (1961) adaptado para cromatografia em camada delgada (CCD) por RHEE et al. (2001). Neste ensaio, utiliza-se a solução dos reagentes ácido 5,5’-ditiobis-2-nitrobenzóico (DTNB) e iodeto de acetilcolina (ATCI) em tampão e a enzima AChE (3 U/mL). A fisostigmina foi utilizada como padrão. A atividade antioxidante foi determinada pelo método de varredura de radical livre DPPH em solução metanólica. O teste de toxicidade frente Artemia salina foi realizado de acordo com a metodologia proposta por MC LAUGHLIN, CHANG e SMITH (1991). Os testes fitoquímicos foram realizados seguindo a metodologia proposta por MATOS (1997).
RESULTADOS E DISCUSSÃO: O extrato etanólico da casca do sapotizeiro teve um excelente resultado frente a inibição da enzima acetilcolinesterase quando comparada com o padrão fisostigmina (Tabela 1). Obtivemos resultado razoável com o teste antioxidante se comparado ao padrão quercetina (Tabela 2). Quanto a toxicidade frente Artemia salina, observamos que o extrato etanólico apresentou uma pequena atividade nas concentrações de 10000 e 1000ppm. No estudo fitoquímico do extrato etanólico do caule da espécie Manilkara zapota foi possível identificar diversos metabólitos secundários tais como: Flavanonois, Flavanonas, Catequinas, Triterpenóides Pentaciclico e Saponinas.
Tabela 1
Teste de inibição frente a da enzima acetilcolinesterase
tabela 2
teste antioxidante
CONCLUSÕES: Podemos concluir que o extrato etanólico do caule da planta, apresentou uma excelente atividade antiacetilcolinesterásica, com halo de inibição que se assemelha ao halo usado como padrão, e desta forma pode ser considerado capaz de inibir a enzima acetilcolinesterase, retardando assim a progressão sintomática da Doença de Alzheimer. De acordo com o resultado do estudo fitoquímico observamos que os metabólitos secundários são os responsáveis pela ação antioxidante e estimulam a continuação das investigações, visando o isolamento e a identificação de novos constituintes.
AGRADECIMENTOS: Os autores agradecem à Universidade Estadual do Ceará.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: ELLMAN, G.C.; COURTNEY, K.D.; ANDRES,V.; FHEATHERSTONE, R.M.A. 1961. New and rapid colorimetric determination of acetiylcolinesterase activity. Biochemical Pharmacology. v. 7, n. 2, p. 88-95.
FILHO, J. M. B.; MEDEIROS, K. C. P.; DINIZ, M. F. F. M.; BATISTA, L. M.; FILHO, P. F. A.; SILVA, M. S.; CUNHA, E. V. L.; ALMEIDA, J. R. G. S. e JÚNIOR, L. J. Q. 2006. Rev. Bras. Farmacogn. 16, 2.
LARSON R. A. 1995. Antioxidant mechanisms of secondary natural products. In: AHMAD S (Ed), Oxidative stress and antioxidant defenses in biology (Chapman & Hall, New York.
MATOS, F. J. A. 1997.Introdução à fitoquímica experimental; 2 ed., Fortaleza: EUFC.
McLAUGHLIN J.L; CHANG C-J; SMITH D.L. 1993. Simple bench-top bioassays (brine shrimp and potato discs) for the discovery of plant antitumor compounds: Review of recent progress. In Kinghorn AD and Balandrin MF, eds. Human Medicinal Agents from Plants. Washington, DC; ACS Symposium Series 534, American Chemical Society; 112–134.
POTTERAT, O. 1997. Antioxidants and free radical scavengers of natural origin. Curr. Organic. Chem., 1: 415-440.
RHEE, I. K.; MEENT, M.; INGKANINAN, K.; VERPOORTE, R. 2001. Screening for acetylcholinesterase inhibitors from Amaryllidaceae using silica gel thin-layer chromatography in combination with bioactivity stainin. Journal of Chromatography A, 915, 217
