ÁREA: Química Orgânica
TÍTULO: SÍNTESE E AVALIAÇÃO DOS EFEITOS DO DERIVADO 5-(4-CLORO-BENZILIDENO)-3-(4-FENIL-BENZIL)-TIAZOLIDINA-2,4-DIONA (LPSF/GQ-24) SOBRE A PRODUÇÃO DE TESTOSTERONA EM RATOS
AUTORES: Silva, L.M.M.G. (UFPE) ; Barros, C.D. (UFPE) ; Lima, M.C.A. (UFPE) ; Galdino, S.L. (UFPE) ; Pitta, I.R. (UFPE) ; Wanderley, M.I. (UFPE) ; Couto, J.A. (UFRPE)
RESUMO: Derivados tiazolidínicos utilizados no tratamento da diabetes mellitus tipo 2
são conhecidos por provocarem uma diminuição na testosterona plasmática, sendo
necessário que haja uma pesquisa por compostos mais seguros que sejam
desprovidos deste efeito colateral. Este artigo expõe a caracterização
estrutural e síntese do derivado 5-(4-cloro-benzilideno)-3-(4-fenil-benzil)-
tiazolidina-2,4-diona (LPSF/GQ24) potencialmente hipoglicemiante ao mesmo tempo
em que se avalia a influência desse fármaco na concentração plasmática de
testosterona livre e ligada (SHBG), em ratos machos adultos, por meio do modelo
ex vivo. Observou-se que o derivado LPSF/GQ-24 apresentou uma menor
redução da secreção de testosterona, o que vem a ser uma vantagem deste novo
composto em relação à rosiglitazona.
PALAVRAS CHAVES: TIAZOLIDINA; DIABETES; TESTOSTERONA
INTRODUÇÃO: Tiazolidinadionas (TZDs), ou glitazonas, representam uma nova geração de drogas
antidiabéticas. Elas melhoram a resistência à insulina, uma das anomalias
principais da diabetes mellitus tipo 2, por ativação do receptor gama
proliferador ativado do peroxissoma , que são fatores de transcrição
pertencentes à superfamília de receptores nucleares (ELTE et al, 2007; KOTA et
al, 2005). Três proteínas, codificadas por genes distintos, têm sido
identificadas: PPAR-α, PPAR-β e PPAR-γ. (TAVARES, 2007).
Os principais representantes do grupo das glitazonas são a troglitazona (TGZ), a
rosiglitazona (RGZ) e a pioglitazona (PGZ) (VILAR, 2006). Esses representantes
(TZDs) são agonistas para PPAR-γ e têm sido utilizados clinicamente como
sensibilizadores de insulina (YAMAGISHI, 2010).
Um estudo realizado por VIERHAPPER e colaboradores (2003) demonstrou que homens
saudáveis, tratados com rosiglitazona, apresentaram redução da produção de
testosterona e di-hidrotestosterona, sem alterações nos níveis do LH e do FSH
(VIERHAPPER et al, 2003). Em um modelo experimental utilizando ratos Zucker
obesos, também observou-se um efeito inibitório sobre a produção da testosterona
(FURNSINN et al,2007).
CARRUTHERS e colaboradores (2008) publicaram a seguinte hipótese: as
glitazonas induzem a deficiência de andrógenos em pacientes com diabetes tipo II
resultando em alterações patofisiológicas em múltiplos tecidos e órgãos, o que
pode explicar seus efeitos adversos observados.
Os estudos acima descritos comprovam que o tratamento com TZDs influencia a
esteroidogênese. Neste trabalho, sintetizamos e investigamos uma tiazolidina
potencialmente hipoglicemiante (LPFS/GQ-24) e investigamos seus efeitos sobre a
testosterona plasmática utilizando estudo ex vivo em ratos machos adultos.
MATERIAL E MÉTODOS: PARTE QUÍMICA
Em um balão de 50 mL foram adicionados os reagentes TA-30 e o IP-4, e em seguida
o solvente (etanol) e o catalisador (piperidina). A mistura reacional foi
deixada em banho de óleo, aquecido por chapa elétrica. A mistura reacional foi
mantida a uma temperatura entre 65˚C e 75˚C. Após uma hora e dez minutos foi
retirada uma amostra da mistura reacional, sendo a mesma submetida a uma análise
em sistema hexano/acetato 7:3. O produto formado foi filtrado e lavado com água
destilada, e logo em seguida devidamente armazenado em dessecador. Após algum
tempo, o produto obtido foi retirado do dessecador, sendo realizada uma placa
cromatográfica para análise. Após a análise observou-se a presença de algumas
impurezas, as quais foram parcialmente removidas por lavagem com etanol a
quente. Por fim, foi realizada uma terceira placa cromatográfica, obtendo-se um
resultado satisfatório.
PARTE BIOLÓGICA
Para os ensaios biológicos, os animais foram divididos randomicamente em grupos
de seis animais, havendo os grupos Teste e Controle. O grupo teste correspondeu
aos tratados com o novo derivado tiazolidínico LPSF/GQ-24. A dose utilizada no
tratamento foi de 5mg/Kg, administradas por via oral (gavagem), por um período
de 15 dias consecutivos. No dia posterior ao término no tratamento, os animais
foram eutasianados utilizando dióxido de carbono. No estudo ex vivo, os
testículos dos animais tratados e posteriormente eutasianados foram removidos e
descapsulados. Logo após, houve a purificação das células com o Gradiente de
Percoll, aspiração da fração 43-68%, lavagem com M199/BSA e por fim, a
contagem dessas células para posterior incubação com estímulos e precursores
esteroidogênicos. A testosterona foi determinada no meio de incubação
por Radioimunoensaio
RESULTADOS E DISCUSSÃO: PARTE QUÍMICA
Na tabela 1 podem ser encontrados os resultados físico-químicos do composto
sintetizado.
PARTE BIOLÓGICA
Os resultados sobre a secreção de testosterona estimulada, representados na
tabela 2, onde a rosiglitazona inibe a produção de testosterona estimulada pelo
hCG e pelo dbcAMP, ativadores indireto e direto da proteína quinase A, a qual
participa da principal via estimulatória da secreção da testosterona. O composto
LPSF/GQ-24, ao contrário, não produziu efeito inibitório sobre a secreção de
testosterona estimulada por estes ativadores, havendo até aumentado o efeito
estimulatório do hCG. A rosiglitazona também inibiu a secreção de testosterona
induzida pelo 22-OH-colesterol, mas não afetou a secreção induzida pela
pregnenolona, indicando inibição da função da enzima p450 scc. O tratamento com
o LPSF/GQ-24 não afetou a secreção de testosterona induzida pelo 22-OH-
colesterol e pela pregnenolona.
Tabela 1
Dados físico-químicos obtidos com a síntese do
LPSF/GQ-24
Tabela 2
Efeitos do tratamento crônico por vo com
Rosiglitazona (5mg/Kg) e LPSF/GQ-24 (5mg/Kg)
durante 15 dias, sobre a secreção de testosterona
induzida.
CONCLUSÕES: O LPSF/GQ-24 apresentou uma menor redução da secreção de testosterona, o que vem a
ser uma vantagem deste novo composto em relação à rosiglitazona. Desta forma, este
estudo se enquadra como uma importante ferramenta na busca de fármacos mais
seguros, tendo em vista a investigação dos efeitos da glitazona sob a
esteroidogênese, que pode vir a comprometer a secreção da testosterona, levando
aos efeitos prejudiciais decorrentes da carência deste hormônio.
AGRADECIMENTOS: Agradecemos à UFPE, à UFRPE e ao CNPq.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: CARRUTHERS, M.; TRINICK, T.R.; JANKOWSKA, E. ; TRAISH, A.M. Are the adverse effects of glitazones linked to induced testosterone deficiency?, Cardiovasc Diabetol, v. 7, p. 1-6, 2008.
ELTE J.W.F., BLICKLÉ J.F. Thiazolidinediones for the treatment of type 2 diabetes, European Journal of Internal Medicine, 18, 18–25, 2007.
KOTA Bhavani Prasad, HUANG Tom Hsun-Wei, ROUFOGALIS Basil D, An overview on biological mechanisms of PPARs. Pharmacological Research, 51, 85–94, 2005.
FÜRNSINN C, NOWOTNY B, BRUNMAIR B. Thiazolidinediones influence plasma steroides of male obese Zucker rats.Endocrinol, v. 143, p. 327-30, 2002.
TAVARES, Vladimir ; HIRATA, M. H. ou HIRATA, M. ; HIRATA, R. D. C. . Receptor ativado por proliferadores de peroxissoma gama (PPARg): Estudo molecular da homeostase da glicose, metabolismo de lipideos e abordagem terapêutica. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia & Metabologia, v. 51, p. 526-533, 2007.
VIERHAPPER, P., NOWOOTNY, P., WALDAUSL. Reduced production rates of testosterone and diidrotestosterone in healtly men treated with rosiglitazone, Elsevier Science, p. 230-232, 2003.
YAMAGISHI K., YAMAMOTO K., MOCHIZUKI Y. , NAKANO T., YAMADA S., TOKIWA H., Flexible ligand recognition of peroxisome proliferator-activated receptor-c (PPARc), Bioorganic & Medicinal Chemistry, v.20,p.3344–3347,2010.