ÁREA: Química Orgânica

TÍTULO: SÍNTESE E AVALIAÇÃO DOS EFEITOS DO DERIVADO 5-(4-CLORO-BENZILIDENO)-3-(4-FENIL-BENZIL)-TIAZOLIDINA-2,4-DIONA (LPSF/GQ-24) SOBRE A PRODUÇÃO DE TESTOSTERONA EM RATOS

AUTORES: Silva, L.M.M.G. (UFPE) ; Barros, C.D. (UFPE) ; Lima, M.C.A. (UFPE) ; Galdino, S.L. (UFPE) ; Pitta, I.R. (UFPE) ; Wanderley, M.I. (UFPE) ; Couto, J.A. (UFRPE)

RESUMO: Derivados tiazolidínicos utilizados no tratamento da diabetes mellitus tipo 2 são conhecidos por provocarem uma diminuição na testosterona plasmática, sendo necessário que haja uma pesquisa por compostos mais seguros que sejam desprovidos deste efeito colateral. Este artigo expõe a caracterização estrutural e síntese do derivado 5-(4-cloro-benzilideno)-3-(4-fenil-benzil)- tiazolidina-2,4-diona (LPSF/GQ24) potencialmente hipoglicemiante ao mesmo tempo em que se avalia a influência desse fármaco na concentração plasmática de testosterona livre e ligada (SHBG), em ratos machos adultos, por meio do modelo ex vivo. Observou-se que o derivado LPSF/GQ-24 apresentou uma menor redução da secreção de testosterona, o que vem a ser uma vantagem deste novo composto em relação à rosiglitazona.

PALAVRAS CHAVES: TIAZOLIDINA; DIABETES; TESTOSTERONA

INTRODUÇÃO: Tiazolidinadionas (TZDs), ou glitazonas, representam uma nova geração de drogas antidiabéticas. Elas melhoram a resistência à insulina, uma das anomalias principais da diabetes mellitus tipo 2, por ativação do receptor gama proliferador ativado do peroxissoma , que são fatores de transcrição pertencentes à superfamília de receptores nucleares (ELTE et al, 2007; KOTA et al, 2005). Três proteínas, codificadas por genes distintos, têm sido identificadas: PPAR-α, PPAR-β e PPAR-γ. (TAVARES, 2007). Os principais representantes do grupo das glitazonas são a troglitazona (TGZ), a rosiglitazona (RGZ) e a pioglitazona (PGZ) (VILAR, 2006). Esses representantes (TZDs) são agonistas para PPAR-γ e têm sido utilizados clinicamente como sensibilizadores de insulina (YAMAGISHI, 2010). Um estudo realizado por VIERHAPPER e colaboradores (2003) demonstrou que homens saudáveis, tratados com rosiglitazona, apresentaram redução da produção de testosterona e di-hidrotestosterona, sem alterações nos níveis do LH e do FSH (VIERHAPPER et al, 2003). Em um modelo experimental utilizando ratos Zucker obesos, também observou-se um efeito inibitório sobre a produção da testosterona (FURNSINN et al,2007). CARRUTHERS e colaboradores (2008) publicaram a seguinte hipótese: as glitazonas induzem a deficiência de andrógenos em pacientes com diabetes tipo II resultando em alterações patofisiológicas em múltiplos tecidos e órgãos, o que pode explicar seus efeitos adversos observados. Os estudos acima descritos comprovam que o tratamento com TZDs influencia a esteroidogênese. Neste trabalho, sintetizamos e investigamos uma tiazolidina potencialmente hipoglicemiante (LPFS/GQ-24) e investigamos seus efeitos sobre a testosterona plasmática utilizando estudo ex vivo em ratos machos adultos.

MATERIAL E MÉTODOS: PARTE QUÍMICA Em um balão de 50 mL foram adicionados os reagentes TA-30 e o IP-4, e em seguida o solvente (etanol) e o catalisador (piperidina). A mistura reacional foi deixada em banho de óleo, aquecido por chapa elétrica. A mistura reacional foi mantida a uma temperatura entre 65˚C e 75˚C. Após uma hora e dez minutos foi retirada uma amostra da mistura reacional, sendo a mesma submetida a uma análise em sistema hexano/acetato 7:3. O produto formado foi filtrado e lavado com água destilada, e logo em seguida devidamente armazenado em dessecador. Após algum tempo, o produto obtido foi retirado do dessecador, sendo realizada uma placa cromatográfica para análise. Após a análise observou-se a presença de algumas impurezas, as quais foram parcialmente removidas por lavagem com etanol a quente. Por fim, foi realizada uma terceira placa cromatográfica, obtendo-se um resultado satisfatório. PARTE BIOLÓGICA Para os ensaios biológicos, os animais foram divididos randomicamente em grupos de seis animais, havendo os grupos Teste e Controle. O grupo teste correspondeu aos tratados com o novo derivado tiazolidínico LPSF/GQ-24. A dose utilizada no tratamento foi de 5mg/Kg, administradas por via oral (gavagem), por um período de 15 dias consecutivos. No dia posterior ao término no tratamento, os animais foram eutasianados utilizando dióxido de carbono. No estudo ex vivo, os testículos dos animais tratados e posteriormente eutasianados foram removidos e descapsulados. Logo após, houve a purificação das células com o Gradiente de Percoll, aspiração da fração 43-68%, lavagem com M199/BSA e por fim, a contagem dessas células para posterior incubação com estímulos e precursores esteroidogênicos. A testosterona foi determinada no meio de incubação por Radioimunoensaio

RESULTADOS E DISCUSSÃO: PARTE QUÍMICA Na tabela 1 podem ser encontrados os resultados físico-químicos do composto sintetizado. PARTE BIOLÓGICA Os resultados sobre a secreção de testosterona estimulada, representados na tabela 2, onde a rosiglitazona inibe a produção de testosterona estimulada pelo hCG e pelo dbcAMP, ativadores indireto e direto da proteína quinase A, a qual participa da principal via estimulatória da secreção da testosterona. O composto LPSF/GQ-24, ao contrário, não produziu efeito inibitório sobre a secreção de testosterona estimulada por estes ativadores, havendo até aumentado o efeito estimulatório do hCG. A rosiglitazona também inibiu a secreção de testosterona induzida pelo 22-OH-colesterol, mas não afetou a secreção induzida pela pregnenolona, indicando inibição da função da enzima p450 scc. O tratamento com o LPSF/GQ-24 não afetou a secreção de testosterona induzida pelo 22-OH- colesterol e pela pregnenolona.

Tabela 1

Dados físico-químicos obtidos com a síntese do LPSF/GQ-24

Tabela 2

Efeitos do tratamento crônico por vo com Rosiglitazona (5mg/Kg) e LPSF/GQ-24 (5mg/Kg) durante 15 dias, sobre a secreção de testosterona induzida.

CONCLUSÕES: O LPSF/GQ-24 apresentou uma menor redução da secreção de testosterona, o que vem a ser uma vantagem deste novo composto em relação à rosiglitazona. Desta forma, este estudo se enquadra como uma importante ferramenta na busca de fármacos mais seguros, tendo em vista a investigação dos efeitos da glitazona sob a esteroidogênese, que pode vir a comprometer a secreção da testosterona, levando aos efeitos prejudiciais decorrentes da carência deste hormônio.

AGRADECIMENTOS: Agradecemos à UFPE, à UFRPE e ao CNPq.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: CARRUTHERS, M.; TRINICK, T.R.; JANKOWSKA, E. ; TRAISH, A.M. Are the adverse effects of glitazones linked to induced testosterone deficiency?, Cardiovasc Diabetol, v. 7, p. 1-6, 2008.
ELTE J.W.F., BLICKLÉ J.F. Thiazolidinediones for the treatment of type 2 diabetes, European Journal of Internal Medicine, 18, 18–25, 2007.
KOTA Bhavani Prasad, HUANG Tom Hsun-Wei, ROUFOGALIS Basil D, An overview on biological mechanisms of PPARs. Pharmacological Research, 51, 85–94, 2005.
FÜRNSINN C, NOWOTNY B, BRUNMAIR B. Thiazolidinediones influence plasma steroides of male obese Zucker rats.Endocrinol, v. 143, p. 327-30, 2002.
TAVARES, Vladimir ; HIRATA, M. H. ou HIRATA, M. ; HIRATA, R. D. C. . Receptor ativado por proliferadores de peroxissoma gama (PPARg): Estudo molecular da homeostase da glicose, metabolismo de lipideos e abordagem terapêutica. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia & Metabologia, v. 51, p. 526-533, 2007.
VIERHAPPER, P., NOWOOTNY, P., WALDAUSL. Reduced production rates of testosterone and diidrotestosterone in healtly men treated with rosiglitazone, Elsevier Science, p. 230-232, 2003.
YAMAGISHI K., YAMAMOTO K., MOCHIZUKI Y. , NAKANO T., YAMADA S., TOKIWA H., Flexible ligand recognition of peroxisome proliferator-activated receptor-c (PPARc), Bioorganic & Medicinal Chemistry, v.20,p.3344–3347,2010.