ÁREA: Bioquímica e Biotecnologia
TÍTULO: SÍNTESE DE PEPTÍDEOS EM FASE SÓLIDA E AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIMICROBIANA
AUTORES: HENRIQUES, F.A.F.A (UFSJ) ; BITENCOURT, A.L.B. (UFSJ) ; ALMEIDA, J.R. (UFSJ) ; RESENDE, L.M. (UFSJ) ; CASTRO, W.M. (UFSJ) ; FERREIRA, J.M.S. (UFSJ) ; SILVA, S.L. (UFSJ)
RESUMO: Esta síntese é uma etapa de um projeto cujo objetivo é sintetizar uma biblioteca de
peptídeos a partir de sequências similares de fosfolipases A2 (PLA2) que apresentaram
atividade antibacteriana. Um peptídeo de 13 aminoácidos foi sintetizado por síntese em
fase sólida com tecnologia de microondas, pré-purificado e sua atividade antimicrobiana
foi avaliada.
PALAVRAS CHAVES: spfs, atividade antimicrobiana.
INTRODUÇÃO: Devido ao crescente desenvolvimento e descobertas sobre o potencial farmacológico de
muitos peptídeos e sua considerável importância comercial, vários métodos estão sendo
testados e descritos para a obtenção de um peptídeo.
Um grande avanço nos estudos da atividade biológica tem sido alcançado nas últimas
décadas devido ao progresso e à eficiência do método chamado de síntese peptídica em
fase sólida (SPFS)(CESPEDES, et al 2011).
O objetivo deste trabalho foi sintetizar um peptídeo com sequência de aminoácidos
baseada em uma região bioativa da fosfolipase A2 e avaliar a atividade antibacteriana
frente a bactérias Gram positivas
e Gram negativas.
MATERIAL E MÉTODOS: O peptídeo foi sintetizado segundo metodologia descrita pelo manual do sintetizador
Discover marca CEM para SPFS e irradiação de microondas. Foram utilizados 0,07mmol de
resina wang-K-Fmoc e teste Kaiser para acompanhamento das etapas de acoplamento e
desproteção.
As etapas de purificação consistiram de precipitação com éter dietílico, liofilização
e cromatografia de alta eficiência HPLC/Shimadzu, coluna C18 gradiente linear fase
móvel A(TFA 0,1% em água) e fase B(Acetonitrila 66% em fase A).
Para avaliação da atividade antimicrobiana, foram utilizados o método de difusão de
poço e difusão em microgota de acordo com metodologias descritas pelo National
Committee for Clinical Laboratory Standards. As bactérias testadas foram Pseudomonas
aeruginosa, Klebisiella pneumoniae, Escherichia coli, Enterococcus faecalis e
Staphilococus aureus.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: O produto da síntese apresentou atividade frente às bactérias Gram negativas
Pseudomonas aeruginosa e Klebisiella pneumoniae.
Foi obtido um perfil cromatográfico satisfatório quando comparado com outros perfis
descritos na literatura para produtos de SPFS sugerindo um alto rendimento da síntese,
mas com a presença de alguns contaminantes. Por isso, este peptídeo encontra-se em fase
de purificação para posterior caracterização química e novos testes de atividade
antimicrobiana.
CONCLUSÕES: A síntese e a atividade deste peptídeo constituiu uma das etapas para o estudo de
várias sequências de aminoácidos que serão sintetizadas neste projeto. Portanto,
peptídeos baseados em PLA2 mostrou ser uma importante classe promissora de novos
antibióticos.
AGRADECIMENTOS: CAPES, CNPq, LQPN.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: Cespedes G. F., Vicente E. F.; e Cilli E. M. Uso da FTIR na obtenção de resinas e na síntese de peptídeos. Quim. Nova, Vol. XY, No. 00, 1-6, 2011.
