ÁREA: Química Analítica
TÍTULO: COMPARAÇÃO ENTRE CINCO PROCEDIMENTOS AVALIADOS PARA O PREPARO DE AMOSTRAS DE SUPLEMENTOS MULTIVITAMÍNICOS E MINERAIS
AUTORES: JÚNIOR,A.F.S. (UFBA) ; COSTA, F.C (UFBA) ; PRAZERES,M.A.G. (UFBA) ; KORN,M.G.A. (UFBA)
RESUMO: A investigação da concentração dos nutrientes em suplementos multivitamínicos e minerais é relevante devido ao aumento do seu consumo. Antes da análise elementar das amostras geralmente torna-se necessário a etapa de pré-tratamento e neste trabalho quatro procedimentos foram investigados, digestão por via úmida, em sistemas abertos e fechados, extração ácida e amostragem em suspensão,e comparados a metodologia de referência (USP 25). ICP OES foi utilizada para análise elementar devido a características como alta sensibilidade, análise multielementar e robustez. O procedimento utilizando bloco digestor apresentou vantagens interessantes, porém a extração se mostrou muito promissoras necessitando de procedimento analítico adequado para determinação multielementar em outras amostras.
PALAVRAS CHAVES: suplementos, preparo de amostra e icp oes.
INTRODUÇÃO: Os suplementos alimentares podem ser definidos como produtos contendo vitaminas, minerais, produtos herbais, extratos de tecidos, proteínas e aminoácidos com o objetivo de melhorar a saúde, o desempenho e prevenir doenças, ou seja a suplementação alimentar é tudo que vem a complementar a alimentação [1]. A avaliação da composição elementar em amostras de suplementos multivitamínicos e minerais se torna importante visto que seu consumo vem aumentando e a necessidade de maior controle da qualidade dos mesmos, pela Indústria farmacêutica, é um fator relevante para assegurar a segurança e eficácia dos mesmos.
Considerando que há poucas informações sobre a composição mineral dos suplementos multivitamínicos e minerais comercialmente disponíveis, com exceção daquelas declaradas nos rótulos, torna-se relevante investigar a concentração dos nutrientes, de forma a estabelecer um perfil preliminar.
A espectrometria de emissão óptica com plasma indutivamente acoplado (ICP OES) tem sido bastante empregada para diferentes tipos de amostras devido, principalmente, as seguintes características: alta sensibilidade, versatilidade, análise multielementar, robustez e rapidez na análise. Entretanto uma etapa de preparo da amostra é geralmente necessária para determinação dos elementos de interesse.
Neste trabalho foram investigados quatro procedimentos de preparo de amostra de cinco amostras de suplementos multivitamínicos e minerais, visando à determinação de macro e micronutrientes por ICP OES. Os procedimentos estudados utilizaram digestão por via úmida, em sistemas abertos e fechados, extração ácida e amostragem em suspensão e foram comparados à calcinação de acordo com metodologia proposta pela Farmacopéia Americana (USP 25), que foi o método de referência.
MATERIAL E MÉTODOS: O preparo das amostras de suplementos multivitamínicos e minerais estão descritos a seguir:
(USP 25) A decomposição de amostras por via seca assistida por forno mufla consistiu em pesar cerca de 1 a 2 gramas de amostra em cadinho de porcelana , em seguida, incinerar a 450 oC por 8 a 12 horas. As cinzas foram dissolvidas em 5 mL de HCl 6,0 mol L-1, em placa de aquecimento (100 oC) até evaporação e a solução resultante foi diluída com HNO3 0,1 mol L-1 .
(P1) O procedimento utilizando aquecimento condutivo foi realizado pesando cerca de 0,5 g de amostra, acrescentando 5 ml de HNO3 65% e colocando em bloco digestor. A solução foi submetida a uma rampa de aquecimento até 150°C, de 20 em 20°C a cada 15 min. Adicionou-se 8 ml H2O2 30%, em alíquotas de 1,0 mL. O digerido foi reduzido a 5 ml.
(P2) Para a digestão em forno de microondas com cavidade, cerca de 0,5 g das amostras foram digeridas com a mistura de 7,5 mL de HNO3 + 1,0 mL de H2O2, o programa está descrito na Tabela 01.
(P3) Para a extração, cerca de 0,3 g das amostras foram pesadas e em seguida foram adicionados 10 mL solução de HCl 1,0 mol.L-1. O sistema (amostra + solução ácida) foi submetido à centrifugação por 5 minutos na rotação de 2000 rpm. A seguir, fez-se a retirada do sobrenadante.
(P4) Para a amostragem sólida em suspensão cerca de 0,5 g das amostras (≤ 100 µm) foram introduzidas no ICP OES após agitação manual, suspensas em HNO3 0,8 mol L-1, com concentração final de 1% (m/v). Todos os experimentos foram realizados em triplicata.
As soluções obtidas após cada procedimento foram transferidas para tubo de centrífuga para posterior quantificação por ICP OES. As curvas analíticas foram preparadas utilizando alíquotas de soluções multielementares (QHEMIS, São Paulo) na faixa de 1,0 a 5,0 µg L-1.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os resultados obtidos para Ca, Cu, Fe, Mg, Mn, Se e Zn nas amostras empregando os procedimentos investigados, comparativamente ao procedimento recomendado pela Farmacopéia Brasileira (USP 25), estão mostrados na Tabela 2. Os procedimentos mostraram-se simples, rápidos e econômicos e os resultados foram concordantes entre si (teste t-pareado, com 95% de confiança), apresentando-se como alternativas viáveis para a determinação de nutrientes nas amostras analisadas. A precisão dos procedimentos foi avaliada através do desvio padrão relativo (RSD) (n = 3), o qual se apresentou inferior a 10%, para a maioria dos elementos quantificados.
Devido ao fato de não se ter disponível padrões certificadores de amostras de Suplementos Multivitamínicos e Minerais utilizou-se material de referência certificado de espinafre NIST 1570 para avaliar a exatidão dos procedimentos.
O procedimento (P1) apesar de apresentar vantagens, tais como menor volume de reagentes, logo menor geração de resíduos, maior freqüência analítica em comparação aos procedimentos (P3) e (P4), mostrou desvantagens em relação ao teor de carbono residual e maior acidez dos digeridos.
O procedimento (P2) demonstrou ser uma alternativa rápida e simples possuindo menores valores para LOD e LOQ e obtendo uma acidez residual para os digeridos cerca de 1,8 mol L-1.
De um modo geral, para os procedimentos (P3) e (P4) foram obtidos percentuais de recuperação na faixa de 26,5%(Cr) - 93,0%(Mg), e 2,1%(Se) - 91,0%(Mn), respectivamente, apesar disso, eles são promissores para a avaliação da disponibilidade destes elementos, necessitando de estudos complementares para otimização de variáveis de forma a viabilizar uma análise multielementar.Cd,Cr,Co são exemplos de elementos que apresentaram valores abaixo do LOQ do método.
CONCLUSÕES: A avaliação da composição elementar nas amostras estudadas é importante, pois seu consumo vem aumentando e um maior controle da qualidade pode assegurar a sua eficácia. Os procedimento investigados empregando digestão por via úmida, em sistemas abertos e fechados, mostraram-se adequados, em termos de simplicidade, precisão e exatidão. Quanto aos procedimentos usando extração ácida e amostragem por suspensão, estudos complementares estão sendo desenvolvidos para otimização das variáveis de forma a se obter um procedimento analítico adequado para determinação multielementar em outras amostras.
AGRADECIMENTOS: FAPESB, CAPES e CNPq
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: [1] ELIASON, B. C. et al. Dietary supplement users: demographics, product use, and medical system interaction. J Am Board Fam Pract. v. 10, n. 4, p. 265-71, 1997.
[2] Krejcova, A. et al. Determination of macro and trace element in multivitamins preparations by inductively coupled plasma optical emission spectrometry with slurry sample introduction, Food Chemistry 98 (2006) 171–178
