ÁREA: Química Analítica
TÍTULO: DISCRIMINAÇÃO DE EXTRATOS DA ESPÉCIE DE Bauhinia variegata L. CONTENDO FRAÇÕES DE POLARIDADE NEUTRA POR UV-VIS E MÉTODOS QUIMIOMÉTRICOS.
AUTORES: JUSTO, R. (UEL) ; SCARMINIO, I. S. (UEL)
RESUMO: A aplicação de métodos quimiométricos no estudo de impressão digital de plantas medicinais aumenta consideravelmente a qualidade da impressão digital das plantas. A união da espectrofotometria UV-Vis e métodos quimiométricos mostrou-se eficiente nesses casos. O objetivo deste trabalho foi fazer uma análise exploratória de diferentes solventes extratores para o fracionamento químico de frações de polaridade neutra da Bauhinia variegata L. para identificação do material vegetal. Os resultados mostraram que existem diferenças de metabólitos extraídos quando usado hexano puro em relação aos demais solventes.
PALAVRAS CHAVES: bauhinia variegata, uv-vis, métodos quimiométricos.
INTRODUÇÃO: A pesquisa fitoquímica tem por objetivos conhecer os constituintes químicos de espécies vegetais ou avaliar sua presença. Após a coleta e secagem, uma das etapas necessária e importante é a extração dos compostos orgânicos da planta. A maioria dos métodos aplicados no controle de qualidade e seleção de plantas superiores consome muito tempo, alguns esforços foram feitos para descobrir novas alternativas analíticas (SIMÕES et al,2002). As observações populares sobre o uso e a eficácia de plantas medicinais contribuem de forma relevante para a divulgação das virtudes terapêuticas dos vegetais, (MACIEL et al,2002) o Brasil apresenta uma grande diversidade de plantas medicinais, destacando-se entre elas a pata-de-vaca (Bauhinia variegata). Ela é uma das plantas de mais amplo uso popular para Diabete melitus. Considerando a importância desta planta no contexto medicinal e os aspectos mencionados anteriormente, propomos nesse trabalho um estudo de diferentes frações obtidas em extratos de pata de vaca, visando obter subsídios para o desenvolvimento de metodologias analíticas para fins quantitativos (WIJESEKERA,1991). Em geral, um ou dois marcadores ativos de plantas ou misturas de plantas são empregados atualmente para avaliar a qualidade e autenticidade das plantas medicinais, esteja ela sozinha ou em mistura (DELAROZA,2007). A aplicação de métodos quimiométricos nestes casos aumenta consideravelmente a qualidade da impressão digital obtida (SOARES,2006). O objetivo deste trabalho foi fazer uma discriminação dos extratos de metabólitos como gorduras e graxas Bauhinia variegata L., mais conhecida como pata de vaca, e utilizar métodos quimiométricos para o desenvolvimento de metodologia analítica para o controle de qualidade de plantas medicinais comercializadas.
MATERIAL E MÉTODOS: Para os 18 extratos foram coletados 10,0g das partes aéreas da planta. Foram usados como solventes extratores acetato de etila, hexano, diclorometano e etanol, planejados para que ficassem dispostos em um tetraedro, onde, em cada vértice ficaram os solventes puros, 4 misturas binárias dos solventes na proporção 1:1 localizados nas arestas, 4 combinações ternárias 1:1:1 formando as faces e 1 misturara quaternária 1:1:1:1 feita em quadruplicada no ponto central do planejamento centróide-simplex. Cada solução ficou em repouso por 24h, depois foram filtrados e concentrados em um evaporador rotatório, com uma temperatura inferior a 65±3oC. O procedimento foi repetido quatro vezes. Ao final do processo os 18 extratos foram secos em capela a temperatura ambiente com o auxílio de um ventilador por 72h. Para o fracionamento químico (STAZI,1996) pesou-se 0,1000g de extrato solubilizado em 3mL do seu solvente extrator e homogeneizou-se no banho ultrassônico em 12mL de metanol e 3mL de água por 5 min. A fração neutra foi extraída por 3 vezes com 30mL de acetato de etila posteriormente filtrada a vácuo em papel filtro. Após a evaporação dos solventes foram feitas as leituras de absorvância na região UV-vis, de cada fração dos extratos adicionando 3,00mL de clorofórmio, em uma diluição de 50L da solução para 1000L de clorofórmio. Os espectros foram registrados num espectrofotômetro OCEAN OPTICS modelo CHEM 2000 UV-VIS. Para os processamentos dos dados dos espectros obtidos por UV-Vis foram utilizados métodos quimiométricos de Análise das Componentes Principais (ACP) do tipo Q. O programa STATISTICA 6.0 foi utilizado para calcular o dendrograma. Os cálculos da ACP foram realizados usando o programa computacional desenvolvido pela Profa. Dra. Ieda S. Scarminio.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: A figura 1 apresenta os gráficos dos escores das componentes principais 2 e 3 nos 18 solventes extratores da Bauhinia variegata L. após o fracionamento químico que resultou na fração de gorduras e graxas. O gráfico mostra 5 grupos diferentes, comprovados pelo dendograma da análise hierárquica na Figura 2. O Grupo I, que foi separado na parte mais negativa da CP2, é o correspondente ao extrato preparado em hexano puro (B02) e que obteve o espectro de UV-Vis que apresentou o menor número de bandas em relação aos demais, ficando assim, separado dos demais grupos. O Grupo II, separado na parte positiva do gráfico dos escores, deve-se ao fato dos extratos terem sido extraídos em misturas que contenham etanol, que no espectro de Uv-Vis depois do grupo IV e V foram o que obtiveram maiores absorvâncias nos resultados. O Grupo III, separado na parte positiva da CP3, distingue os extratos feitos com misturas contendo diclorometano e hexano, que obtiveram espectros com menor absorvância em relação aos outros grupos. O Grupo IV, encontrado na parte mais negativa da CP3, corresponde a extratos de misturas onde o solvente extrator é o diclorometano, e no espectro de UV-vis nota-se que foram os extratos que obtiveram maiores absorvâncias. O Grupo V, localizado praticamente no cruzamento da CP2 com a CP3, é o grupo onde os extratos em sua maioria foram extraídos com acetato de etila, que quando observados no espectro UV-Vis nota-se uma absorvância intermediária em relação a todos os extratos.
CONCLUSÕES: Os resultados da análise de componentes principais e análise hierárquica mostraram que existem cinco grupos separados de acordo com o solvente extrator e as absorvâncias obtidas nos espectros de UV-Vis. Na fração neutra da planta Bauhinia variegata L., foi apresentado que existe diferença de compostos químicos extraídos pelo solvente hexano puro (Grupo I dos escores) e os demais solventes. E os outros grupos, diferiram-se uns dos outros apenas pela intensidade das absorvâncias no espectro de Uv-Vis relacionado aos seus solventes extratores.
AGRADECIMENTOS: Os autores agradecem a UEL, a Capes, ao CNPq pelo auxílio, e a Fundação Araucária pela bolsa concedida.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: DELAROZA, F. Influência da composição da fase móvel e meio extrator na qualidade da impressão digital cromatográfica da Bauhinia variegata L. por planejamento estatístico. Dissertação de Mestrado em Química dos Recursos Naturais, Universidade Estadual de Londrina, 2007.
DI STAZI, Luiz Cláudio. Plantas medicinais: arte e ciência. Um guia de estudo interdisciplinar. Luiz Claudio Di Stazi organizador. São Paulo: Editora UNESP, p. 230,1996.
MACIEL, M. A. M., PINTO, A. C., VEIGA JR, V. F., GRYNBERG, N. F., ECHEVARRIA, A., Plantas Medicinais: A necessidade de estudos multidisciplinares, Química Nova, v.25, nº3, p.429-438,2002.
SIMÕES, C. M.; SCHENKEL, E. P.; GOSMANN, G.; MELLO, J. C. P.; MENTZ, L. A.; PETROVICK, P. R. Farmacognosia: da planta ao medicamento. Ed. 4, Porto Alegre e Florianópolis, Ed. UFRGS e UFSC, 2002.
SOARES, P. K. Taxonomia por abordagem metabolômica e métodos quimiométricos para análise e rastreio de plantas de plantas do gênero bauhinia. Dissertação de Mestrado em Química dos Recursos Naturais, Universidade Estadual de Londrina, 2006.
WIJESEKERA, R. O. B. The Medicinal Plant Industry CRC Press, p. 99, 1991.
