ÁREA: Química Orgânica
TÍTULO: FUNGITOXICIDADE DE TIOFENOS ISOLADOS POR CLAE SOBRE Lasiodiplodia theobromae
AUTORES: BARROS, C. C (UECE) ; MARQUES, M. M. M (UECE) ; CASTRO, R. A. O (UECE) ; VIEIRA, I. G. P (UFC) ; SILVA, A. R. A (UECE) ; MORAIS, S. M. (UECE)
RESUMO: Foi determinada atividade antifúngica, in vitro, de tiofenos isolados do extrato hexânico de Tagetes erecta sobre o desenvolvimento micelial do fungo Lasiodiplodia theobromae, oriundo de plantas de caju. Foram isolados três tiofenos por CLAE e identificados como BBT [5-(3-buten-1-inil)-2,2’-bitienil], BBTOH [5-(4-hidroxi-1-butinil)-2,2’-bitienil, BBTOAc [5-(3-buten-1-inil)-2,2’-bitienil e α-T (2,2’.5’,2’-tertienil). BBT, BBTOH e α-T inibiram em 47,73%, 47,0% e 43,4% o crescimento micelial do fungo, respectivamente. Os tiofenos apresentaram significante atividade antifúngica contra o fungo Lasiodiplodia theobroma.
PALAVRAS CHAVES: tagetes erecta, atividade antifúngica e lasiodiplodia theobromae.
INTRODUÇÃO: O fungo fitopatogênico Lasiodiplodia theobromae é o responsável pela “podridão-seca”, doença que ataca várias frutíferas tropicais em qualquer época do ano. Atualmente, L. theobromae é responsável por doenças importantes em mangueira (Mangifera indica L.), coqueiro (Cocos nucifera L.), cajueiro (Anacardium occidentale L.), Spondias spp., dentre outras (FREIRE et al, 2004). O controle de doenças pós-colheita de frutas ainda baseia-se no uso de fungicidas sintéticos (CASTORIA et al., 2001). Entretanto, há uma grande limitação sobre aspectos de segurança dos mesmos em função dos possíveis efeitos carcinogênicos e tetratogênicos bem como, toxicidade residual (SKANDAMIS et al., 2001). Atualmente, uma das alternativas pesquisadas envolve o uso de extratos de plantas e óleos essenciais buscando explorar suas propriedades fungitóxicas. Tendo em vista as várias atividades dos tiofenos como inseticida (HARBORNE, 1991), larvicida (WU et al., 2007), nematicida (NATARAJAN et al., 2006), antifúngico (CHOBOT et al., 2003), antibacteriano (MATSUURA et al., 1996), antiviral (HUNDSON et al., 1989), anti-leishmania (RAM et al., 1997) e antioxidante (YANAGIMOTO et al., 2002), neste estudo, objetivou-se isolar, por CLAE, os tiofenos presentes em Tagetes e analisar a atividade antifúngica, in vitro, destes compostos sobre o desenvolvimento micelial de Lasiodiplodia theobromae isolados de cajueiros.
MATERIAL E MÉTODOS: As raízes de Tagetes erecta foram trituradas mecanicamente e submetidas à extração à quente em soxhlet com hexano. Após a evaporação do solvente com auxílio do evaporador rotatório, o extrato obtido foi submetido a cromatografia líquida de alta resolução (CLAE), nas seguintes condições: vazão de 8 ml/min, comprimento de onda 330 nm, eluente 100% acetonitrila, coluna semi-preparativa Shim-pack PREP-ODS; loop de injeção de 5000 μL. Usou-se como padrão o α-tertienil (α-T). A elucidação estrutural dos compostos isolados foi realizada através de espectrometria de massa e ressonância magnética nuclear (1H e 13C). Para avaliação da inibição do crescimento micelial de L. theobromae, foi utilizada soluções dos tiofenos incorporados ao meio de cultura Aga Dextrose Batata (DBA) fundente, de modo a se obter concentrações de 6,25, 12,5, 25, 50 ppm vertidos em placas de Petri. Para as testemunhas, foram usadas placas contendo apenas o DBA. Após a solidificação dos meios, discos de 0,7 cm de diâmetro foram retirados da zona de crescimento das colônias do fungo e colocados no centro das placas. Culturas puras do fungo fitopatogênico Lasiodiplodia theobromae foram obtidas junto à micoteca da Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária – Centro Nacional de Pesquisa da Agroindústria Tropical (EMBRAPA/CNPAT), isolados do cajueiro na cidade de Pacajus/Ce. As avaliações foram feitas em 24, 48 e 72 horas após a incubação, na temperatura de 25ºC, e por comparação com o crescimento micelial das colônias nas placas testemunhas. Para cada tratamento foram empregadas três repetições.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: O extrato hexânico após concentração apresentou 0,3716g e foi dissolvido em metanol obtendo-se uma concentração de 16,4 mg/mL, sendo injetado no CLAE semi-preparativo. Os compostos tiofênicos isolados por CLAE foram caracterizados espectroscopicamente como T1, T2 e T3 com pesos finais de 17,9mg, 16,4mg e 16,4mg, respectivamente. O composto T3 foi determinado como -T , pois apresentou o mesmo tempo de retenção que o padrão utilizado -T. Os compostos T1 e T2 foram confirmados como sendo o 5-(3-buten-1-inil)-2,2’-bitienil (BBT) e 5-(4-hidroxi-1-butinil)-2,2’-bitienil (BBTOH).
Os resultados da atividade antifúngica dos tiofenos isolados por CLAE mostraram que os tiofenos T1, T2 e T3 apresentaram uma correlação positiva entre toxicidade e concentração. T1 e T3 inibiram 47,73% e 47,0% o crescimento micelial do fungo L. theobromae no menor tempo de exposição aos compostos, enquanto T2 inibiu 43,4% na maior concentração e tempo de exposição. Estudos anteriores confirmam a atividade antifúngica de -tertienil e BBTOH contra fungos fitopatogênicos (FOKIALAKIS et al., 2006).
CONCLUSÕES: Os tiofenos, principalmente BBT, apresentaram significante atividade antifúngica contra o fungo Lasiodiplodia theobromae e poderam servir como compostos base para o desenvolvimento de um fungicida natural.
AGRADECIMENTOS: Agradecemos ao apoio financeiro dado pela Fundação Cearense de Apoio à Pesquisa (FUNCAP) e a Universidade Estadual do Ceará, pela bolsa de Iniciação Científica
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