ÁREA: Produtos Naturais
TÍTULO: AVALIAÇÃO DAS ATIVIDADES FUNGITÓXICAS A PARTIR DO EXTRATO BRUTO E FRAÇÕES DA RAÍZ DE PLANTAS PERTENCENTES AO GÊNERO Derris (urucu e nicou).
AUTORES: RIBEIRO, K.M (UFPA) ; SOUZA, R.F (UFPA) ; SANTOS, A.S (UFPA) ; OLIVEIRA, A.M (UFPA) ; AMORIM DE DEUS, R.J (UFPA) ; BANNA, D.A.D.S (UFPA) ; VASCONCELOS, N.C.V (UFPA)
RESUMO: Foram investigados os extratos brutos das raízes e frações dos timbós (Derris urucu e Derris nicou) frente a fungos filamentosos de modo a se avaliar as atividades fungitóxicas. Foram utilizadas doze linhagens dos fungos filamentosos e três linhagens de leveduras. As metodologias utilizadas basearam-se em técnicas do PIC (porcentagem de inibição de crescimento micelial) e a difusão em ágar denominado de método de dispersão de ativos sobre a camada microbiana (ASCM). Os resultados mostraram que tanto os extratos brutos quanto as frações não apresentam atividades fungitóxicas, ressaltando-se que as investigações foram executadas com concentrações de 20 % m/v para os extratos brutos e 10% m/v para as frações. Através das metodologias aplicadas pôde-se confirmar que a planta investigada in vitro não apresenta potencial suficiente para ser considerada fonte de um antifúngico.
PALAVRAS CHAVES: fungitóxicas ,fungistática, potencial.
INTRODUÇÃO: A produção de compostos químicos naturais representa 7,5 % do mercado de produtos químicos, farmacêuticos, veterinários e de produção de plantas ( FAZOLIN, 2004). Os indígenas da América do Sul, particularmente da Amazônia, fazem suas pescas com o uso de timbó, principalmente quando maior quantidade de alimentos seja necessário. Estas plantas são cipós trepadores que atingem a copa das árvores pertencentes ao gênero Derris, dentro da família das Leguminosas. Há muitas espécies de timbó, mas as de uso mais generalizado são D. urucu e D. nicou, que possuem em suas raízes uma substância chamada rotenona, de onde deriva a importância dessas plantas (LIMA, 1987). Inúmeras doenças, ao longo do tempo, estão sendo adquiridas; podem ser por vias bacterianas ou por vias fúngicas, e por este motivo um grande número de antibiótico vem sendo desenvolvido. Entretanto, a ausência e a ineficácia das atividades sobre um grande número de microorganismos resistentes é um dos fatores que leva à busca de substâncias mais potentes. A rotenona é a substância mais importante encontrada nas raízes do timbó devido ao fato de apresentar toxicidez quinze vezes maior do que a nicotina (CHANDLER. 1965, 551p). Esta atividade apresenta alta eficácia contra várias pragas da lavoura, inclusive aos pulgões, e pode substituir com vantagens muitos agrotóxicos, já que não faz mal aos animais domésticos (MARKLOUF, 1986). Com bases nos estudos já existentes e nas evidências da atividade biocida do extrato aquoso do timbó (COSTA, et al, 1986), este trabalho foi realizado com a perspectiva de se estudar, de forma preliminar, a utilização dos extratos brutos e frações da Derris nicou e Derris urucu como possíveis agentes antifúngicos.
MATERIAL E MÉTODOS: A coleção de microorganismos foi gentilmente cedida por instituições nacionais. As linhagens dos fungos filamentosos foram obtidas no Laboratório de Coleção de Culturas de Fungos do Instituto Oswaldo Cruz/fiocruz, já as linhagens de fungos fitopatógenos foram obtidos no Laboratório da Embrapa Amazônia Oriental. Os equipamentos utilizados: Balança Analítica (SARTORIUS modelo BP210S), Autoclave vertical (PHOENIX / MODELO AV75), Estufa para esterilização e secagem (NEVONI / MODELO-NV1.5), Capela de fluxo laminar (PACHANE / MODELO-PA320), Agitador tipo Vortex (QUIMIS). Os meios de cultura, bem como o material e vidrarias utilizadas, foram esterilizados em autoclave vertical a 121°C por 15 min. Após esterilização, os materiais foram levados para capela de fluxo laminar onde antes de se iniciar qualquer trabalho, a capela foi submetida à exposição de lâmpada de ultravioleta por 15 minutos. Os meios de cultura utilizados nos bioensaios fungicidas foram: Czapeck-Dox, BDA (Batata, dextrose, ágar). Preparo das soluções: Para o extrato bruto foi de 20% m/v (200mg da amostra diluída em 800µL de dimetilsulfóxido (DMSO)), e para as frações foi de 10% m/v (100mg da amostra diluída em 900µL de dimetilsulfóxido (DMSO)). As linhagens de fungos: Trichophyton rubrum; Trichophyton mentagrophytes; Trichoderma harzianum; Aspergillus flavus; Aspergillus niger; Aspergillus tamarii; Fusarium oxysporum, foram utilizados para a investigação sistemática do efeito antifúngico de amostras investigadas, utilizando a técnica de Difusão em Agar e a técnica de PORCENTAGEM DE INIBIÇÃO DE CRESCIMENTO (PIC) FOI UTILIZADA PARA AS SEGUINTES LINHAGENS DE FUNGOS: fitopatógenos: Macrophomina phaseolina; Sclerotium rolfsii; Lasiodiplodia theobromae; Rhizoctonia solani.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: Resultado dos ensaios realizados com fitopatógenos. A metodologia de difusão em ágar, após a realização dos bioensaios contra fungos fitopatógonos, mostrou-se bastante eficiente, principalmente, por necessitar de uma quantidade pequena de amostras em cada disco (2µL), com isso é possível realizar os testes com uma concentração desejada, mesmo que a amostra possua pouca massa. Além do que facilita a visualização dos resultados, pois em uma placa pode-se analisar o efeito da amostra, do controle positivo e do controle negativo, porém de acordo com o quadro 01 abaixo os bioensaios não apresentaram atividades fungitóxicas com fungos fitopatógenos.
Resultados dos ensaios realizados com dermatófitos. A concentração do extrato do timbó utilizada foi de 20%, já a concentração das frações do timbó utilizadas foram de 10% dados estes descritos no quadro 02. O resultado mostrou que independentemente da concentração utilizada dos extratos e das frações a concentração letal foi 0%.
CONCLUSÕES: A investigação sistemática das classes de substâncias químicas existentes no extrato bruto e nas frações do timbó evidenciou-se a presença de substâncias pertencentes ao grupo dos flavonóides. Os testes biocidas com os fungos (dermatófito e fitopatógenos), apresentaram resultados negativos, devido o valor de concentração letal ter sido de 0%. Dentro das condições experimentais realizadas com os extratos brutos de Derris urucu e Derris nicou, e nas frações, não se observou qualquer atividade fungitóxica. Não havendo, portanto, quaisquer características potenciais de uso neste sentido.
AGRADECIMENTOS:
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: 1- COSTA, N. A. et al. Uso do Timbó urucu (Derris urucu) no Controle de Piolho (Haematopinus tuberculatus) em Bubalinos. Belém: EMBRAPA/CPATU, 1986. Boletim de Pesquisa, 78.
2- CHANDLER, A.C.; READ, C.P. Introducción a La Parasitologia. Barcelona: Ediciones Omega S.A. 1965, 551p.
3- FAZOLIN, M. Cientistas tentam desenvolver Inseticidas Naturais a Partir de Plantas da Amazônia. Disponível em <http//: www.canalciencia. ibict. br / pesquisas / pesquisa.php>. Acesso em 24 jun. 2004.
4- MARKLOUF, L. A Volta do Timbó, o Terror das Pragas. Revista Globo Rural. Rio de Janeiro: Editora Globo. Ano1, n.9, p.86-89, set. 1986.
