ÁREA: Química Analítica
TÍTULO: DETERMINAÇÃO DA OXITETRACILINA EM SISTEMA DE ANÁLISE POR INJEÇÃO SEQÜENCIAL UTILIZANDO DETECTOR POTENCIOMÉTRICO ATRAVÉS DE ELETRODOS SELETIVO
AUTORES: CUNHA, C.O. (UFPE) ; ALVES, S.J (UFPE) ; ARAÚJO, A.N (FFUP) ; MONTENEGRO, M.C.B.S.M. (FFUP) ; SILVA, V.L. (UFPE)
RESUMO: Os fármacos estão sendo utilizados cada vez mais indiscriminadamente, resultando perigo na contaminação ambiental.O objetivo do trabalho é avaliar a aplicabilidade de eletrodos sensíveis à oxitetraciclina utilizando sistema de análise por injeção seqüencial para monitoramento de amostras farmacêuticas.Foram empregadas membranas sensoras variando suas composições utililizando b-ciclodextrina, diferentes tipos de solvente mediador e plastificante.A determinação dos interferentes foi realizada através do método das soluções separadas, obtendo um coeficiente de seletividade inferior a 0,25 mol/L.Os valores médios da concentração obtida pelo método proposto e o de referência (CLAE) mostram uma boa correlação, confirmada pelo desvio padrão e erro relativo inferior a 1,5% e 3,0%, respectivamente.
PALAVRAS CHAVES: eletrodos íon-seletivo; oxitetraciclina; sia
INTRODUÇÃO: O crescente desenvolvimento da indústria farmacêutica tem conduzido a um esforço cada vez maior no sentido de assegurar métodos analíticos rigorosos, para o controle de qualidade dos produtos com rapidez e custo reduzido.
A oxitetraciclina (OTC) é um dos contaminantes mais significativos na fauna e flora aquática, e seu uso indiscriminado têm contribuído para o aparecimento de resistência bacteriana com conseqüências graves ao nível da saúde humana (FINLAY et al., 1995).
A maioria dos métodos até então propostos são baseados em técnicas separativas por cromatografia gasosa e por cromatografia liquida de alta eficiência (KIM et al., 2005), espectrometria de massa, espectrofotometria no UV-Vis (KARLICEK et al., 1994) ou espectrofotometria por fluorescência (OUYANG et al., 1999).
Dadas as características das técnicas utilizadas e a complexidade de algumas análises, essas metodologias são precedidas de métodos de preparação das amostras envolvendo várias etapas de preparação que utilizam solventes tóxicos, que são morosos e que muitas das vezes levam à perda do fármaco.
A potenciometria com elétrodos íon-seletivos (ESIs) é considerada uma técnica vantajosa, devido ao baixo custo, facilidade de manuseamento, rapidez de análise e facilidade de preparação das amostras.
Neste trabalho é proposto um sistema automático para determinação potenciométrica de fármacos contendo cloridrato de oxitetraciclina empregando eletrodo íon-seletivo de contato sólido. Após a construção do eletrodo, este foi acoplado a um sistema de análises de injeção seqüencial (SIA), permitindo assim, uma maior facilidade na manipulação de amostras e reagentes, obtendo uma maior taxa de amostragem e determinação de procedimentos mais limpos por trabalhar com volumes reduzidos.
MATERIAL E MÉTODOS: Os reagentes utilizados foram de grau analítico p.a., sem qualquer tipo de tratamento ou purificação adicional. Todas as soluções foram preparadas com água deionizada de condutividade igual ou inferior a 0,1 mS/cm.
As soluções estoque de oxitetraciclina, preparadas na forma de cloridratos, foram obtidas a partir da dissolução do tampão contendo I = 0,1 mol/L de glicina com HCl, assim como as amostra comerciais de Terramicina Comprimido (500 mg de OTC.HCl) e Terramicina intra-muscular (50 mg/mL de OTC.HCl).
Foi empregado o método de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detector DAD-UV como método de referência utilizando em sua fase móvel ácido oxálico, acetonitrila e metanol, nas proporções de 75:14:11 (v/v/v), respectivamente.
No sistema SIA desenvolvido, as soluções foram propulsionadas por uma bomba peristáltica, onde as amostras foram inseridas com uma válvula rotatória de 8 portas. Por intermédio de um decimilivoltímetro foi avaliada a diferença de potencial entre o eletrodo de trabalho e o eletrodo de referência de dupla junção Ag/AgCl Orion 90-00-02. A alça de amostragem entre a bomba peristáltica e a válvula rotatória foi de 100 cm.
A construção dos eletrodos íon-seletivos foi baseada em uma metodologia simples e barata, que consistia na deposição da membrana, por gotejamento, em um suporte adequado (LIMA, et al., 1986).
Após otimização das melhores características sensoras foram preparadas membranas contendo 6,0mg da beta-ciclodextrina, 0,408g de dibutil ftalato e 0,18g de PVC-COOH previamente dissolvido em THF.
A zona de operacionalidade foi determinada pelo diagrama de Reilley. A avaliação da interferência foi determinada pelos coeficientes de seletividade potenciométrica.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: As características dos eletrodos íon-seletivos construídos foram determinadas a partir de calibrações sucessivas utilizando solução de OTC.Cl (0,001 mol/L) com força iônica ajustada (0,1 mol/L) (BUCK, et al., 1993). A partir de uma média (n=18) foi obtido limite inferior de resposta linear (4,3x10-5 mol/L); limite prático de detecção (2,0x10-5 mol/L); declive (54,5 mV/dec); R2 (0,9995); tempo de resposta (20s); tempo de vida (6 meses).
Após o traçado do diagrama de Reilley foi verificado que a determinação do analito é favorecida em meio ácido, pois para valores de pH superiores a 6 ocorre a precipitação do OTC.Cl, sob a forma de óxidos e hidróxidos. Foram observados melhores resultados de amplitude do sinal analítico para valores com pH 3 (Figura 1). Dessa maneira fez-se o uso de um tampão iônico, que atua como quelante do íon primário na amostra (BAKKER, 1996).
Os coeficientes de seletividade potenciométricos de algumas espécies iônicas (Ca2+, Na2+, Mg2+, Li+, K+, Fe3+, Cu3+ e NH4+) foram determinados através do método das soluções separadas com 1x10-5, 5x10-4 e 1x10-4 mol/L, apresentando baixos valores, inferiores a 0,25 mol/L, considerando, portanto, seletivos.
As amostras farmacêuticas foram preparadas em matrizes diferentes, onde uma determinada quantidade das respectivas apresentações foi diluída, dentro da faixa linear de trabalho, para posterior detecção em SIA, obtendo uma freqüência analítica de 25 amostras/h.
Os resultados obtidos (n=3) foram comparados com aqueles fornecidos pela análise das mesmas amostras utilizando o método de referência por CLAE (Tabela 1).
Os valores médios da concentração obtida pelo método proposto e o de referência mostram uma boa correlação confirmada pelo desvio padrão e erro relativo inferior a 1,5% e 3,0%, respectivamente.
CONCLUSÕES: Através da preparação de eletrodos seletivos a OTC, tendo como base diferentes membranas sensoras foi possível a seleção de uma unidade potenciométrica de características adequadas à determinação em formulações farmacêuticas.
Os valores encontrados a partir de sistemas SIA foram confrontados com aqueles resultantes da execução dos procedimentos de referência, confirmando-se assim a exatidão das análises potenciométricas.
Os procedimentos analíticos aqui propostos constituem uma importante alternativa aos métodos descritos na literatura, sobretudo pela sua simplicidade e rapidez.
AGRADECIMENTOS: FACEPE - CAPES
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: [1] FINLAY, A.C.; HOBBY, G.L.; PAN, S.Y.; REGNA, P.P.; ROUTIEN, J.B.; SEELEY, D.B.; SHULL, G.M.; SOBIN, B.A.; SOLOMONS, I.A.; VINSON, J.W.; KANE, J.H. 1995. Terramycin, a New Antibiotic. Science, 111: 85.
[2] KIM, S.C.; CARLSON, K. 2005. LC–MS2 for quantifying trace amounts of pharmaceutical compounds in soil and sediment matrices. Trends in Analytical Chemistry, 24, 635-644.
[3] KARLICEK, R.; SOLICH, P. 1994. Flow-injection spectrophotometric determination of tetracycline antibiotics. Analytica Chimica Acta, 285: 9-12.
[4] OUYANG, J.; BAEYENS, W.R.G.J.; DELANGHE, J.; VAN DER WEKEN, G.; VAN DAELE, W.; DE KEUKELEIRE, D.; GARCÍA CAMPANA, A. M. 1999. Chemiluminescence-based liquid chromatographic determination of hydrochlorothiazide and captopril. Analytica Chimica Acta, 386, 257-264.
[5] LIMA, J. L. F. C.; MACHADO, A. A. S. C. 1986. Procedure for the construction of all-solid state PVC membrane electrodes. Analyst, 111: 799-802.
[6] BUCK, R. P.; COSOFRET, V. V.; LINDNER, E. 1993. Anion effects on Donnan failure of aminated-poly (vinyl chloride)-based and neutral-carrier-based pH sensors. Analytica Chimica Acta, 20: 273-281.
[7] BAKKER, E. 1996. Origin of anion response of solvent polymeric membrane based silver ion-selective electrodes. Sensors and Actuators B: Chemical, 35: 20-25.
