ÁREA: Química Analítica
TÍTULO: ANÁLISE EXPLORATÓRIA DO EXTRATO BRUTO DAS FOLHAS DA ANNONA MURICATA L POR MÉTODOS QUIMIOMÉTRICOS
AUTORES: SOUZA, E. B. R. (UEL) ; SCARMINIO, I. S. (UEL) ; SILVA, R. R. (UEL)
RESUMO: RESUMO: Este trabalho descreve a aplicação de métodos quimiométricos na análise exploratória do extrato bruto das folhas da Annona muricata L visando obter subsídios para o desenvolvimento da impressão digital do material vegetal. Os espectros de infravermelho dos extratos foram discriminados de acordo com os grupos funcionais de estiramentos de OH, possivelmente de compostos fenólicos e OH livre e estiramento de N-H, de aminas secundárias. Esta discriminação pode estar relacionada com as propriedades ácido, base e interações de dipolo do sistema extrator.
PALAVRAS CHAVES: annona muricata, métodos quimiométricos.
INTRODUÇÃO: INTRODUÇÃO: A partir da década de 80, um novo estímulo surgiu para o estudo fitoquímico da família Annonaceae, devido ao isolamento de uma nova classe de substâncias naturais bioativas. A graviola (Annona muricata L.) possui um grupo de fitoquímicos denominadas acetogeninas e várias delas são bem documentadas como antitumorais (JUNQUEIRA et al., 1999).
A graviola apresenta inúmeras propriedades terapêuticas, entre elas potencial diurético, adstringente, vitaminizante, antiinflamatório, anti-reumático, bem como sua propriedade antiespasmódica, antitussígena e anticancerígena (JUNQUEIRA et al., 1999).
A planta contém milhares de diferentes metabólitos secundários. É bem conhecido que o perfil metabólico de uma espécie pode variar dependendo de vários fatores entre eles a idade da planta, a época da colheita, condições do solo, condições do tempo, parte da planta usada. Os metabólitos secundários de material vegetal representam muitas classes de diferentes compostos incluindo aminoácidos, gorduras, carboidratos e ácidos orgânicos. Isto gera problemas na escolha do protocolo de extração, porque as condições de extração diferem muito para os diferentes tipos de compostos. Por exemplo, para extração de metabólitos polares são usados o etanol, metanol ou água, enquanto que para os mais lipofílicos o solvente mais comum é o clorofórmio. A escolha dos reagentes envolve um compromisso entre maximizar a eficiência da extração e garantir o maior ou menor número de metabólitos dependendo do caso em estudo (DUNN & ELLIS, 2005). Este trabalho teve como objetivo fazer uma análise exploratória do extrato bruto das folhas da Annona muricata L por métodos quimiométricos, visando obter subsídios para o desenvolvimento da impressão digital do material vegetal.
MATERIAL E MÉTODOS: MATERIAL E MÉTODO: A coleta das folhas do material vegetal foi realizada no jardim experimental do Departamento de Química da Universidade Estadual de Londrina no ano de 2007. Após a coleta, as plantas foram fragmentadas com tesoura e secas por onze dias em lugar arejado, à temperatura ambiente e protegida da luz, umidade, ataque de fungos, insetos e roedores. A moagem foi realizada com o auxílio de um liquidificador, em seguida o material foi armazenado em embalagem de papelão.
A extração foi feita por maceração e remaceração. Os solventes do meio extrator foram etanol, acetato de etila, diclorometano, acetona e clorofórmio. As proporções dos solventes deste meio foram escolhidos de acordo com o planejamento de misturas de cinco componentes (BARROS et al., 2007), totalizando 31 combinações de diferentes extratos brutos.
Para o preparo de cada extrato foram pesados 10,0000g de folhas secas moídas e submetidas à extração por maceração com 90 mL do solvente ou da mistura de solventes em banho de ultra-som. Em seguida foram filtradas com algodão e submetidas à evaporação num evaporador rotativo a uma temperatura de até 70 ˚C. A remaceração foi realizada 3 vezes nas mesmas condições da maceração.
Para a análise por espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier as pastilhas foram preparadas pesando 0.0050g de cada extrato e homogeneizados com 0,1500g de KBr e algumas gotas de clorofórmio. Os espectros no infravermelho foram registrados na região de 4000-400 cm-1, com resolução de 1,93 cm 1 e média de 80 leituras.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os extratos foram submetidos à análise de FTIR e análise de fatores para identificar possíveis diferenças nas extrações.
Uma matriz com 31x1866, (31 extratos e 1866 valores de absorvâncias nos diferentes números de onda cm-1), foi analisada através da projeção dos escores e loadings. A Figura 1 mostra o gráfico dos escores do fator2fator3, no qual verifica-se a formação de quatro grupos diferentes. Os três primeiros fatores explicam 99,8% de variância total dos dados.
No gráfico dos loadings existem três regiões discriminatórias. Uma região está compreendida entre (3668-3048 cm-1) que caracteriza a absorção de ν O-H de álcoois (3600-3200 cm-1) e fenóis (3400-3200 cm-1). Esta região também tem contribuição das absorções de  N-H de aminas, amidas e lactanas. A segunda região está entre 1800-1590 e possui pico de 1740 cm-1, que indica a presença de grupamento de carbonila (C=O) que pode estar associada a grupos funcionais de aldeídos (1740- 1720 cm-1), cetonas (1770-1700 cm-1) e ácidos carboxílicos (1760-1660 cm-1). O pico de absorção na região de 1760-1660 cm-1 pode ser característica da presença de flavonóides e terpenóides. A terceira região entre 1590-1096 cm-1 pode conter picos de olefinas ou compostos aromáticos (1600-1450 cm-1), bandas características de alguns grupos funcionais com δ de N-H no plano, ν C-N de amida (~ 1400 cm-1), fenóis (1390-1330 e 1260-1880 cm-1), ésteres (1275-1020 cm-1).
O dendrograma da análise hierárquica está representado na Figura 2. O valor de distância de conexão 0,15 mostra que quatro grupos são discriminados, confirmando os resultados obtidos pela análise de fatores.
CONCLUSÕES: Com a aplicação dos métodos quimiométricos aos espectros FTIR verificou-se que os extratos apresentam diferenças na composição química devido ao meio extrator. No fator 2, os extratos do grupo I apresentaram maiores concentrações de substâncias com grupos funcionais  OH, de compostos fenólicos e OH livre, ao contrário do grupo III. No fator 3, os extratos do grupo IV apresentaram maiores concentrações com grupos funcionais  N-H, de aminas secundárias, ao contrário do grupo II. A discriminação pode estar relacionada com as propriedades ácido, base e interações de dipolo do sistema extrator.
AGRADECIMENTOS: AGRADECIMENTOS: Ao CNPq pelo apoio financeiro e as bolsas de E. B. R. S e I. S. S. E a CAPES pela bolsa de R.R.S .
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: REFERÊNCIAS: BARROS, B. N. SCARMINIO, I. S. BRUNS, R. E. Como Fazer Experimentos: pesquisa e desenvolvimento na ciência e na indústria. Campinas, editora: UNICAMP, 2007.
DUNN, W. B., ELLIS, D. I. Metabolic: current analytical platforms and methodologies. Trends in Analytical Chemistry, v. 24, n. 4, p. 285-294, 2005.
JUNQUEIRA, N. T. V.; OLIVEIRA, M. A. S.; ICUMA, I. M.; RAMOS, V. H. V. Cultura da graviola. In: Incentivo à fruticultura no Distrito Federal: Manual de fruticultura. Distrito Federal: Editora Coolabora, 1999.
