ÁREA: Química Orgânica
TÍTULO: AVALIAÇÃO ANTIMICROBIANA DE UM DERIVADO TIAZOLIDINICO, FRENTE A ISOLADOS CLÍNICOS OBTIDOS DE DIFERENTES SÍTIOS DE INFECÇÃO
AUTORES: MEDEIROS, A. C. C. M. (UFPE) ; SILVAB,C, I. M. (UFPE/FABEJA) ; ALBUQUERQUE, J. F. C (UFPE) ; SENA, K. X. F. R. (UFPE) ; MAGALHÃES, L.P.M. ()
RESUMO: O composto 5-(3-metoxi-4-hidroxibenzilideno)-4-tioxo-tiazolidina-2-ona (HR-26), um derivado da tiazolidina, foi sintetizado com o objetivo de avaliar a atividade microbiológica frente a isolados clínicos. Assim, foram utilizados microrganismos multirresistentes isolados de Staphylococcus aureus obtidos do Hospital das Clínicas/ UFPE. Foi efetuado o teste de difusão em disco em diferentes concentrações do derivado (300, 150 e 75µg/disco), seguido das CMI e CMB do derivado e dos antibióticos padrões. Todos os microrganismos testados formaram halos de inibição frente ao composto avaliado em todas as concentrações utilizadas. A CMI e CMB dos isolados, referentes ao composto avaliado, foram intermediários entre os valores de CMI para as drogas padrões, cefalexina e ampicilina, respectivamente.
PALAVRAS CHAVES: 4-tioxo-tiazolidina-2-ona, staphylococcus aureus, multirresitência
INTRODUÇÃO: A resistência das diversas espécies bacterianas aos antimicrobianos atuais varia entre países, regiões e a origem hospitalar ou comunitária das estirpes. Algumas espécies apresentam resistência largamente difundida em todo o mundo, como é o caso do Staphylococcus aureus (TAVARES, 2000). No Brasil mais de 70% das bactérias que causam infecções hospitalares são resistentes a pelo menos um dos antimicrobianos utilizados para no tratamento dos pacientes (OLIVEIRA e SILVA, 2008). A pesquisa por novos antibióticos continua para combater a resistência dos microrganismos aos antibióticos anteriores, mesmo sabendo que a maioria dessas substâncias não possua aplicação prática (DEMAIN, 1981). A literatura descreve as tiazolidinas como substâncias sintetizadas e analisadas durante as últimas décadas em vários países, principalmente devido à sua capacidade de atuar em diversos alvos biológicos (SILVA, 2005). Derivados tiazolidínicos foram sintetizados e avaliados in vitro contra Candida albicans, Staphylococcus aureus e Escherichia coli. Todos os compostos testados apresentaram moderada ação apenas para S. aureus. Nenhum foi ativo para E. coli. (TUNÇBILEK e ALTANLAR, 1999). Muitos derivados tiazolidínicos foram sintetizados e testados por, contra bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e Mycobacterium tuberculosis, obtendo resultados satisfatórios para a maior parte dos produtos testados (BONDE e GAIKWAD, 2004). Diante da acentuada resistência bacteriana aos antimicrobianos, em especial, as hospitalares e à necessidade de novas drogas mais eficazes procurou-se avaliar o potencial antimicrobiano do derivado tiazolidínico, 5-(3-metoxi-4-hidroxibenzilideno)-4-tioxo-tiazolidina-2-ona (HRJ-26) frente a isolados clínicos visando a afirmação de uma nova droga contra infecções bacterianas.
MATERIAL E MÉTODOS: O derivado tiazolidínico foi obtido pela da condensação da tiouréia com ácido monocloroacético, em meio aquoso originando a tiazolidina-2,4-diona (I). Em seguida a reação de tionação na posição 4, em presença de dioxano seco e pentassulfeto de fósforo formando a 4-tioxo-tiazolidina-2-ona (II). Na etapa seguinte houve a condensação da 4-tioxo-tiazolidina-2-ona (II) com benzaldeido substituído, na posição 5 do anel heterocíclico em meio ácido e acetato de sódio para obtenção do produto (III). A atividade antimicrobiana foi avaliada pelo método de difusão em disco frente a isolados clínicos, de diferentes setores hospitalares, obtidos e identificados no Hospital das Clínicas da UFPE, sendo estes: S. aureus, obtido de secreção [1], Ponta de cateter [2] e de secreção nasal [3]. As cepas na maioria são multirresistentes. Foram testados 3 isolados de Staphylococcus aureus em Discos de 6 mm impregnados com 10µl de cada de solução, nas concentrações 300µg, 150µg e 75µg da droga, em placas de Petri, no meio semeado e incubado a 35ºC, por 24 horas. Os padrões foram a ampicilina (penicilina semi-sintética) e a cefalexina (cefalosporina de primeira geração) de 10 µg/disco e 30 µg/disco respectivamente, por apresentarem anel tiazolidínico nas penicilinas e derivados relacionados (SOUZA et al, 2000). Foi determinada a Concentração Mínima Inibitória (CMI) e da Concentração Mínima Bactericida (CMB) a partir de uma solução-mãe de 1280µg/ml com alíquotas de diferentes volumes, colocadas em placas de Petri e homogeneizadas com meio de cultura Muller Hinton de forma que foram obtidas placas de concentrações: 128µg/mL, 64µg/mL, 32µg/mL, 16µg/mL, 8µg/mL, 4µg/mL e 2µg/mL. Os microrganismos-teste foram semeados em estria sobre a superfície do meio, as placas foram incubadas a 35ºC por 24 horas.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os dados espectrométricos do 5-(3-metoxi-4-hidroxibenzilideno)-4-tioxo-tiazolidina-2-ona) foram: 1HNMR (D2O/ND3, 300 MHz, δ ppm), (s, 3H, 3,83) (s, 1H, 8,05); (s, 1H, 13,69); (s, 1H, 10,22); (s, 1H, 7,24); (d, 1H, 7,18, J = 8,40 Hz); (d, 1H, 6,94, J = 8,40 Hz;). Os Halos de inibição em mm para as concentrações estabelecidas S. aureus [1] variou entre 19 e 15 mm, S. aureus [2] entre 14 e 12 mm e S. aureus [3] entre 21 e 14 mm. O derivado tiazolidínico para S. aureus [1] apresentou halo significativo, pois os padrões testados não se apresentaram efetivos para este isolado, S. aureus [2] foram praticamente os mesmos formados pelos padrões e para o S. aureus [3] os padrões testados apresentaram halos entre 33-40 mm para Cefalexina e Ampicilina respectivamente. O composto 5-(3-metoxi-4-hidroxibenzilideno)-4-tioxo-tiazolidina-2-ona apresentou atividade para todos os isolados testados em todas as concentrações analisadas, corroborando com os resultados obtidos por (TUNÇBILEK e ALTANLAR, 1999; BONDE e GAIKWAD, 2004). Nos discos de concentração 300µg do composto avaliado, a maioria das cepas testadas apresentou diâmetro de halos de inibição satisfatórios compatíveis com o intervalo. Os isolados de Staphylococcus aureus apresentaram CMI de 32µg/mL, enquanto que a CMB de 64µg/mL. Os valores mostraram-se elevados em virtude da multirresistência dos isolados, porém com valores de CMI e CMB menores para os isolados do S. aureus [1] e [3]. A eficácia clínica da cefalexina (cefalosporina de primeira geração) frente a Staphylococcus aureus é muito baixa (FONSECA, 1999) em concordância com o observado nos resultados de CMI do teste padrão realizado. O composto avaliado apresentou CMI e CMB maiores que o padrão, ampicilina, o que nos leva a afirmar que este produto tem boas perspectivas.
CONCLUSÕES: A estrutura química do composto 5-(3-metoxi-4-hidroxibenzilideno)-4-tioxo-tiazolidina-2-ona (HRJ-26), foi determinada através de métodos físicos espectrométricos convencionais. Todas as constantes físicas foram determinadas. A comprovação da pureza do composto foi avaliada através desses métodos indicados, O composto apresentou ação antimicrobiana frente aos isolados clínicos nas diferentes concentrações, sendo mais eficaz na de 300µg por disco. A CMI e CMB foram intermediários entre valores apresentados nos padrões. O composto avaliado tem boas perspectivas de ação contra infecção hospitalar.
AGRADECIMENTOS: A AEB, FABEJA/FAEB pelo incetivo e apoio a formação continuada de seus colaboradores.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA: BONDE, C. G.; GAIKWAD, N. J. Synthesis and preliminary evaluation of some pyrazine containing thiazolines and thiazolidinones as antimicrobial agents. Bioorganic & Medicinal Chemistry, v.12, p.2151-2161, 2004.
DEMAIN, A. L. Industrial microbiology. Science, v.214, n.4524, p.987-995, 1981.
FONSECA, A. L. Antibióticos na Clínica Diária. 6ºed. Rio de Janeiro: Publicações Médicas LTDA (EPUB), 1999.
OLIVEIRA, A. C.; SILVA, R. S. Desafios do cuidar em saúde frente à resistência bacteriana: uma revisão. Revista Eletrônica de Enfermagem, v.10, n.1, p. 189-197, 2008.
SILVA, I. M. Síntese e avaliação de derivados tiazolidínicos. 98p. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia de Produtos Bioativos) – Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2005.
SOUZA, I. A.; MORAES, I. C. B.; SILVA, F. S. V. B.; LIMA, M. C. A; GALDINO, S. L.; PITTA, I. R. Novos derivados tiazolidinônicos: preparação e avaliação da Atividade antiinflamatória. Anais da XXII Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Química (SBQ), 2000.
TAVARES, W. Bactérias gram-positivas problemas: resistência do estafilococo, do enterococo e do pneumococo aos antimicrobianos. Rev. Soc. Bras. Med. Trop., v.33 n.3, Uberaba, 2000.
TUNNÇBILEK, M.; ALTANLAR, N. Synthesis and antimicrobial evolution of some 3-(substituted phenacyl)-5-[4`-(4H-oxo-1-benzopyran-2yI)-benzylidene}-2-4-thiazolidine-diones. II Farmaco, v.54, p.475-478, 1999.
