ÁREA: IC-Iniciação Científica
TÍTULO: DESENVOLVIMENTO DE METODOLOGIA ANALÍTICA PARA A DETECÇÃO RESÍDUOS DE PESTICIDAS
AUTORES: K.C.DE A.KLOCK1; Y.O. DE PAULA2; C.M. GOETZ3- 1ALUNA DO CURSO DE BACHARELADO EM QUíMICA INDUSTRIAL DA UEG; 2BOLSISTA DTI-7H CNPQ; 3PROFESSORA UNUCET-UEG – CGOETZ@UOL.COM.BR
RESUMO: A utilização de defensivos agrícolas tem aumentado devido à demanda por alimentos de qualidade. A presença de resíduos dos pesticidas em alimentos e meio ambiente devem ser detectados devido suas ações toxicológicas. O controle oficial desses resíduos em alimentos no Brasil, é de responsabilidade do Ministério da Saúde, através da ANVISA. Para a detecção desses traços novos métodos analíticos são desenvolvidos na intenção de obter melhores resultados com pequenas quantidades de reagentes e menor tempo de bancada. Este trabalho se propõe a desenvolver uma metodologia para a detecção de carbofuran, um pesticida bastante utilizado no tratamento de sementes de cereais, legumes e frutas. As respostas devem ser rápidas para que não se prejudique os agricultores e o comercio desses produtos.
PALAVRAS CHAVES: análise de resíduo, hplc e metodologia analítica.
INTRODUÇÃO: Os carbamatos, que possuem ação inseticida e nematicida, pertencem a uma classe de pesticidas de terceira geração sendo muito utilizados hoje. Seu uso abusivo pode gerar intoxicações em humanos e contaminação do meio ambiente. Para se detectar resíduos de pesticidas em quantidades que possam apresentar perigo à saúde humana em alimentos, novos métodos analíticos alternativos, precisos e exatos estão sendo desenvolvidos (Janssom, et al, 2004), (Alder, et al, 2004), (Nunes and Barceló, 1999) e (Onuska and Terry, 1993) de modo a atestar, cada vez mais rápido, a liberação dos produtos para consumo no mercado interno e externo, já que os convencionais necessitam de muitas etapas de bancada, resultando na utilização exagerada de tempo e solventes.
Com base nessas informações este trabalho foi desenvolvido com objetivo de fazer a extração do inseticida carbofuran, em alimentos e determinar pela técnica de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Para tal, devemos testar métodos alternativos de extração, compará-los com o oficial (refluxo em soxhlet), escolher o melhor solvente de extração e fazer a validação do método.
MATERIAL E MÉTODOS: A matriz, semente de milho, foi obtida na feira do produtor na cidade de Goiânia/GO. Nas análises foram utilizadas sementes trituradas e passadas em peneira granulométrica. Alíquotas de 100 g da matriz foram fortificadas com 0,5; 1,0; 2,5 e 5,0 mL de carbofuran 35%.
Testamos três métodos de extração, o convencional em soxhlet, por ultra-som e em funil de separação. As extrações foram realizadas conforme técnicas específicas. Após evaporação do solvente foi feita a re-suspensão com metanol grau HPLC e injeção no cromatógrafo.
Os materiais utilizados foram: Balança analítica, estufa, extrator tipo Soxhlet, copo de Goldfish, cartucho, pipeta de Pasteur, aparelho de ultra-som cleaner, funil de separação, evaporador rotativo. O cromatógrafo Varian, bomba ternária modelo 240 SDM, detector UV-Visível modelo 310, amostrador modelo auto Sampler 410; software VarianStar Workstation 6.0. A coluna foi C18 chromspher 250x4,6mmm, partícula 5µmm, de aço inox.. A fase móvel foi metanol/água. O comprimento de onda 280nm, vazão de 1mL/min, volume de injeção 10µL e tempo de análise de 14 minutos. Os reagentes diclorometano e metanol P.A. (Merck) e grau HPLC J.T.Backer.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os resultados obtidos pela análise por HPLC das amostras resultantes das três técnicas de extração tiveram os tempos de retenção e áreas do pico comparadas.
No cromatograma do milho sem carbofuran (branco) figura 1, observamos a ausência de pico. Já nos cromatogramas obtidos das amostras fortificadas pode ser observado um pico no tempo de retenção 9,21 minutos. Este pico é compatível com o da amostra injetada com a solução do padrão do pesticida, figura 2.
Nos cromatogramas obtidos das amostras extraídas em Soxhlet, com solventes diclorometano e metanol, figuras 3 e 4, observamos em ambos um pico com tempo de retenção 9,18 e 9,21 minutos respectivamente, com intensidade de sinal diferentes, nas mesmas condições cromatográficas. Essa diferença mostra que houve variação na quantidade da substância extraída em Soxhlet, ou seja na eficiência dos dois solventes, já que a área do pico é proporcional à concentração da substância. O metanol foi mais eficiente que o diclorometano nas mesmas condições analíticas. A maior área do pico e maior intensidade do sinal provam isto, logo ele foi utilizado como solvente para os dois outros métodos de extração.
CONCLUSÕES: Em todas as técnicas de extração o solvente mais eficiente foi o metanol. Uma nova metodologia utilizando este solvente foi desenvolvida utilizando menor tempo de análise e de reagentes utilizados, utilizando a extração em funil de separação
AGRADECIMENTOS:Finep projeto 2440/02pelos equipamentos e ao CNPq pelas bolsas concedidas.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA:Janssom, C., Pihlstrom, T., Osterdahl, B., Markides, K. E., A new multi-residue method for analysis of perticide residues in fruit and vegetables using liquid chromatography with tandem mass spectrometric detection. Journal Chromatography, 1023, 93-104, 2004.
Alder, L., Luderitz, S., Lindtner, K., Star, H., The ECHO technique – the more effective way of data evaluation in liquid chromatography – tandem mass spectrometry analysis, Journal Chromatography, 1058, 67-79, 2004.
Nunes, G. S., Barceló, D., Analysis of carbamate insecticides in foodstuffs using chromatography and immunoassay techniques. Trends in analytical chemistry, vol. 18, no. 2, 1999
Onuska, F. I., Terry, K. A., Extraction of pesticides from sediments using a microwave tecnique. Chromatographia, vol. 36, 191-194, 1993.